[发明专利]没食子酰基葡萄糖类化合物的制备方法与用途

权利要求书

1.没食子酰基葡萄糖类的化合物I 1-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡 喃糖、化合物II 1，6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖、化合物III 1，4-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖、化合物IV 1，4，6-三-O-没食子 酰基-β-D-葡萄吡喃糖和化合物V  1，3，4，6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄 吡喃糖，或其药学上可接受的盐类作为活性成分用于制备抗白血病药 物的用途。

2.没食子酰基葡萄糖类化合物I 1-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃 糖、化合物IV 1，4，6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖和化合物V 1，3，4，6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖，或其药学上可接受的盐类 作为活性成分用于制备抗缺氧药物或抗缺氧保健品的用途。

3.权利要求1所述化合物I、II、III、IV、V的制备方法，该方 法包括以下步骤：

取南酸枣的干燥树皮3.2kg粉碎后用市售医用95％v/v乙醇室温 浸提，每次用乙醇25升浸泡7天，共提4次，合并提取液，减压浓缩 干燥，得乙醇提取物750g；该乙醇提取物750g悬浮于3升水中，依 次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各种溶剂每次用3升，分别各萃 取4次，合并相同萃取液，减压浓缩干燥，得到氯仿萃取物60g、乙 酸乙酯萃取物310g、正丁醇萃取物300g和水层残留物80g；

将上述南酸枣的正丁醇萃取物300g用适量甲醇溶解，加适量大孔 树脂AB-8吸附、干燥，上大孔树脂AB-8柱，用不同体积比的水-乙醇 梯度洗脱，根据薄层检测结果收集合并洗脱液，减压浓缩干燥，依洗脱 流出顺序得两个水洗组分20g的B-1、38g的B-2和共计230g的若干 后续流出含水乙醇洗脱组分；

20g的组分B-1用适量水溶解，直接上Sephadex LH-20凝胶柱， 用不同体积比的水-乙醇梯度洗脱，根据薄层检测结果收集合并洗脱液， 减压浓缩干燥，得五个组分：13g的水洗脱部分B-1-1、1.1g的水洗脱 部分B-1-2、1.4g的水-乙醇80∶20洗脱部分B-1-3、0.25g的水-乙醇60∶40 洗脱部分B-1-4、0.8g的水-乙醇30∶70洗脱部分B-1-5、3.2g的乙醇洗 脱部分B-1-6；0.8g的B-1-5用适量体积百分数70％的甲醇水溶解， 添加到用相同体积百分数70％甲醇水装填的Sephadex LH-20柱上，并 用体积百分数70％的甲醇水洗脱精制，得到35mg化合物I；

38g的组分B-2用适量甲醇溶解，加适量聚酰胺吸附、干燥，上聚 酰胺柱，用不同体积比的水-丙酮梯度洗脱，根据薄层检测结果合并所收 集的洗脱液，减压浓缩，得八个组分：10g的水洗脱部分B-2-1、2g的 水洗脱部分B-2-2、1.5g的水-丙酮9∶1洗脱部分B-2-3、1.7g的水-丙酮 9∶1洗脱部分B-2-4、2g的水-丙酮9∶1洗脱部分B-2-5、5g的水-丙酮 7∶3洗脱部分B-2-6、5g的水-丙酮5∶5洗脱部分B-2-7和5g的丙酮洗 脱部分B-2-8；2g的组分B-2-5用适量甲醇溶解，加适量聚酰胺吸附、 干燥，上聚酰胺柱，用不同体积比的乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，收集洗脱 液并根据薄层检测结果合并，减压浓缩干燥，得1g的乙酸乙酯-甲醇6∶1 洗脱部分B-2-5-1、0.6g的乙酸乙酯-甲醇4∶1洗脱部分B-2-5-2和0.4g 的乙酸乙酯-甲醇2∶1洗脱部分B-2-5-3；1g的B-2-5-1用适量体积比 70∶30的甲醇-水溶解，直接上Sephadex LH-20柱，用相同体积比70∶30 的甲醇-水溶剂洗脱，收集洗脱液并根据薄层检测结果合并含化合物V 的洗脱组分，减压浓缩并经甲醇中重结晶精制，得270mg的白色针晶 化合物II；

0.6g的B-2-5-2用适量甲醇溶解，加适量聚酰胺吸附、干燥，上聚 酰胺柱，用体积比20∶10的乙酸乙酯-甲醇洗脱，根据薄层检测结果收集 洗脱液，减压浓缩干燥，依洗脱流出先后顺序分为350mg的B-2-5-2-1 和200mg的B-2-5-2-2两个组分；200mg的B-2-5-2-2用适量甲醇溶 解，加适量聚酰胺吸附、干燥，上聚酰胺柱，用体积比4∶1的乙酸乙酯- 甲醇洗脱，根据薄层检测结果收集含化合物III的洗脱液，减压浓缩干 燥，再次同法用相同聚酰胺柱层析分离，收集含化合物III的洗脱组分， 减压浓缩干燥，并经甲醇中重结晶精制，得27mg的结晶型粉末化合物 III；

将上述的南酸枣的乙酸乙酯萃取物100g用适量甲醇溶解，加适量 聚酰胺吸附、干燥，上聚酰胺柱，用不同体积比的乙酸乙酯-甲醇梯度洗 脱，收集洗脱液并根据薄层检测结果合并，减压浓缩干燥，得到四个层 析粗组分：4g的乙酸乙酯洗脱部分E-1、35g的乙酸乙酯-甲醇9∶1洗 脱部分E-2、25g的乙酸乙酯-甲醇1∶1洗脱部分E-3和15g的甲醇洗脱 部分E-4；

15g的E-4用适量甲醇溶解，加入2倍量聚酰胺吸附、干燥，进 行聚酰胺柱层析用氯仿-甲醇溶剂系统梯度洗脱，收集洗脱液并根据薄层 检测结果合并，减压浓缩干燥，得到2个组分，2.0g的V氯仿∶V甲醇 ＝1∶1洗脱部分E-4-1和12.0g的甲醇洗脱部分E-4-2；12.0g的E-4-2 用适量体积百分数90％的甲醇水溶解进行Sephadex LH-20凝胶柱层 析，用相同体积百分数90％的甲醇水洗脱，收集洗脱液并根据薄层检测 结果合并，减压浓缩干燥，得到3个组分：7.2g的E-4-2-1、2.3g的 E-4-2-2和2.5g的E-4-2-3；其中，E-4-2-1用适量甲醇溶解后放置易析 出结晶，经预实验选择体积比30％的甲醇水溶液进行重结晶精制，得4 g的化合物IV；E-4-2-2经反复Sephadex LH-20柱层析，用体积百分数 60％的甲醇水洗脱，收集含目的化合物的洗脱组分，并在甲醇中反复重 结晶精制，得152mg的化合物V。