[发明专利]一种体外检测精子存活率的方法无效
| 申请号： | 200810207660.1 | 申请日： | 2008-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN101762684A | 公开（公告）日： | 2010-06-30 |
| 发明（设计）人： | 施惠娟;赵洪鑫;贾晓峰;袁瑶;史庭燕;刁华;林菊芳;宋丽伟;时伟丽;徐彦 | 申请（专利权）人： | 上海市计划生育科学研究所 |
| 主分类号： | G01N33/48 | 分类号： | G01N33/48;G01N21/64;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 张睿 |
| 地址： | 200032*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 体外 检测 精子 存活率 方法 | ||
1.一种体外检测精子存活率的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：
(a)将精子悬浮液和膜通透性的核染料混合得到待测样品1；所述的膜通透性的核染料选自Transgreen、SYTO或SYBR；
(b)用荧光酶标仪检测待测样品1，得到第1次样品检测荧光强度；
(c)将待测样品1和碘化丙啶(propidium iodide，PI)混合得到待测样品2；
(d)用荧光酶标仪检测待测样品2，得到第2次样品检测荧光强度；和
(e)存活系数越大，精子存活量越大。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：
(a)将精子悬浮液和精子培养液分别同膜通透性的核染料混合得到待测样品1和对照样品1；所述的膜通透性的核染料选自Transgreen、SYTO或SYBR；所述的精子培养液选自：HTF(Human Tubal Fluid人输卵管液)、BWW培养液、或M16培养液；
(b)用荧光酶标仪分别检测待测样品1和对照样品1，得到第1次样品检测荧光强度和第1次对照检测荧光强度；
(c)将待测样品1和对照样品1分别同碘化丙啶(propidium iodide，PI)混合得到待测样品2和对照样品2；
(d)用荧光酶标仪分别检测待测样品2和对照样品2，得到第2次样品检测荧光强度和第2次对照检测荧光强度；和
(e)存活系数越大，精子存活量越大。
3.如权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，精子悬浮液和所述的膜通透性的核染料的混合大于等于20分钟后用荧光酶标仪检测待测样品1，得到第1次样品检测荧光强度。
4.如权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，所述的精子悬浮液是将精液和精子培养液混合。
5.如权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，所述的待测样品1、对照样品1、待测样品2、和对照样品2都在酶标板上。
6.如权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，所述的荧光酶标仪检测波长为470nm或516nm。
7.如权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，所述的荧光酶标仪检测时，激发光波长为485nm，吸收波长为515nm。
8.如权利要求1或2任一所述的方法，其特征在于，所述的精子悬浮液中的精子来自人、鼠、猪、牛、羊、狐等动物。
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