[发明专利]女性不孕不育检测蛋白芯片及其试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白芯片疾病检测产品，具体地说，涉及一种女性不孕不育检测蛋白芯片及其试剂盒。

背景技术

据世界卫生组织预测，在21世纪，不孕不育将成为仅次于肿瘤和心脑血管病的第三大疾病。权威的数据显示，在已婚夫妇中非意愿性不孕发生率为7％～46％。尽管不同地域存在差异，但一般被认为在8％～15％。目前国内不孕患者占已婚妇女总数的10％，国外要占15％，发病率都有逐年上升趋势。一般而言，不孕因素女方要占2/3，男方要占1/3。

女性的不孕不育症从时间顺序上讲有原发和继发之分。原发是指女性性成熟后从未怀孕或生育过，继发是指过去曾有过妊娠或分娩史而再次出现不孕不育。从病理上讲，女性不孕不育的原因归纳起来有器质性病变、内分泌因素、免疫因素与精神因素等。根据黄绍坤等人的文章(760例继发性不孕不育女性患者的免疫学检查结果分析，中国优生与遗传杂志，1006-9534(2003)01-0076-02)显示，免疫性因素造成的女性不孕不育是大部分不明原因不孕不育、继发性不孕不育和反复流产的主要原因，对继发性不孕不育患者进行一整套免疫因素的诊断和治疗是非常有必要的。

女性不孕不育的免疫学诊断是近年才开展的较新诊断方法。目前主要包括抗卵巢抗体(AOA，anti-ovarian antibody)、抗子宫内膜抗体(AEA，anti-endometrial antibody)、抗精子抗体(ASA，anti-spermatozoa antibody)、抗透明带抗体(AZP，anti-zona pellucidantibody)、抗心磷脂抗体(ACA，anti-cardiolipin antibody)、抗人绒毛膜促性腺激素抗体(HCG-ab，human chorionic gonadotropin antibody)、抗滋养细胞膜抗体(ATA，anti-trophoblast membrane antibody)等指标。

抗卵巢抗体(AOA)的产生是由于卵巢损伤、感染、炎症等原因造成卵巢抗原的外溢而导致的。其中约42％-52％的不孕及流产患者中有抗卵巢抗体(AOA)的高表达。AOA的表达会进一步加重卵巢的损伤，并导致子宫、胎盘的功能不健全，从而引起不孕和流产。

抗子宫内膜抗体(AEA)是由于子宫在病理状态下，如子宫内膜炎、子宫内膜异位症及子宫腺肌症等，可转化成抗原或半抗原，刺激机体而产生的抗体。此外，人工流产刮宫时，胚囊也可能作为抗原刺激机体产生抗体。一旦女性体内有抗子宫内膜抗体存在，便会导致不孕、停孕或发生流产。

精子作为一种独特的抗原，与机体免疫系统接触后可引起自身或同种免疫反应，产生抗精子抗体(ASA)，抗精子抗体所致不孕占不孕患者的10％～30％。男女体内都可能存在抗精子抗体。在男性抗精子抗体存在于血清或精浆中，在女性则存在于血清或宫颈粘液中。ASA与宫颈粘液蛋白结合，可干扰精子穿过排卵期宫颈粘液；ASA的调理作用可促进生殖道局部吞噬细胞对精子的吞噬；抗精子头部的抗体还能阻断精卵结合，引起补体介导的受精卵的融解，损害胚胎植入及前期胚胎发育导致早期流产。

抗透明带抗体(AZP)是由妇女自身免疫性反应产生的。透明带是披覆于卵子表面的糖蛋白)抗体。每一月经周期总有一些卵泡变为闭锁卵泡，其中的透明带如有活性，可成为抗原刺激而产生抗透明带抗体，或由于感染致使透明带变性，刺激机体产生抗透明带抗体。抗透明带抗体遮盖了位于透明带上的精子受体，使精子不能认识卵子，也就无从与卵子结合。同时抗体可以稳定透明带表面结构，因而能抵抗精子顶体酶对透明带的溶解作用，使精子穿透不了透明带。如已受精，因透明带结构的稳定，致胚胎被封固在透明带内，而无法着床。

抗心磷脂抗体(ACA)是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。常见于系统性红斑狼疮(SLE)及其他自身免疫性疾病。该抗体与血栓形成、血小板、自然流产或宫内死胎关系密切。ACA阳性者死胎发生率为76％左右，反复的自然流产和宫内死胎与ACA呈显著正相关。ACA阳性率的孕妇在妊娠早期易反复流产，在妊娠中，后期易发生宫内胎儿死亡，特别是ACA-IgG水平中至高度升高者。Oshiro对检测过ACA且流产2次以上妇女进行回顾性研究发现，ACA阳性妇女发生宫内胎儿死亡是较发妊娠早期流产更具特点的类型。而Lockshin等的研究揭示ACA能更早更敏感地预测自发性流产。