[发明专利]人类原癌基因KRAS的检测方法及试剂盒无效
| 申请号: | 200810203261.8 | 申请日: | 2008-11-24 |
| 公开(公告)号: | CN101736080A | 公开(公告)日: | 2010-06-16 |
| 发明(设计)人: | 姜正文;丁达 | 申请(专利权)人: | 上海天昊生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海思微知识产权代理事务所(普通合伙) 31237 | 代理人: | 郑玮 |
| 地址: | 201203 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 人类 基因 kras 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种KRAS基因突变的检测方法,其特征在于,包括步骤:
(a)抽提样品中的DNA,用特异性引物在特定的扩增条件下进行PCR扩增;
(b)对扩增产物进行测序,与正常KRAS基因比较,是否存在基因突变。
2.权利要求1所述的KRAS基因突变的检测方法,其特征在于,所述步骤(a)中同时用2对以上针对KRAS基因不同外显子的特异性引物进行PCR扩增。
3.权利要求2所述的KRAS基因突变的检测方法,其特征在于,所述步骤(a)中同时用3对或4对针对KRAS基因不同外显子的特异性引物进行PCR扩增。
4.权利要求2所述的KRAS基因突变的检测方法,其特征在于,所述特异性引物选自下组中的2对以上:
(a)SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;
(b)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8;
(c)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10;
(d)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12。
5.权利要求4所述的KRAS基因突变的检测方法,其特征在于,所述特异性引物为以下4对:
(a)SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;
(b)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8;
(c)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10;
(d)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12。
6.一种检测KRAS基因突变的试剂盒,其特征在于,它含有2对以上针对KRAS基因不同外显子的特异性引物。
7.权利要求6所述的检测KRAS基因突变的试剂盒,其特征在于,所述特异性引物选自下组中的2对以上:
(a)SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;
(b)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8;
(c)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10;
(d)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12。
8.权利要求7所述的检测KRAS基因突变的试剂盒,其特征在于,所述特异性引物为以下4对:
(a)SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;
(b)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8;
(c)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10;
(d)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12。
9.权利要求7或8所述的检测KRAS基因突变的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还含有PCR扩增试剂。
10.权利要求9所述的检测KRAS基因突变的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还含有PCR产物纯化酶。
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