[发明专利]微量临床样本中核酸的快速提取方法及其试剂盒无效
申请号: | 200810166954.4 | 申请日: | 2008-09-28 |
公开(公告)号: | CN101684463A | 公开(公告)日: | 2010-03-31 |
发明(设计)人: | 胡林;尤其敏;王宏莹;罗英;钟华燕;石坚 | 申请(专利权)人: | 杭州优思达生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京东方汇众知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 刘淑芬 |
地址: | 320012浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微量 临床 样本 核酸 快速 提取 方法 及其 试剂盒 | ||
1、一种从各种微量临床样本中快速提取核酸的方法,其包括以下步骤:
(a)将临床样本加入裂解液,混匀;
(b)抽吸临床样本,流经过滤膜,样本中的核酸成分因膜的特异性吸附而吸附在过滤膜上,滤液为有细胞碎屑和蛋白质的废液;
(c)抽吸清洗液,流经过滤膜,清洗过滤膜上残留的蛋白质或其它成分,弃滤液;
(d)抽吸洗脱液,流经过滤膜,将吸附在膜上的核酸成分洗脱,而得到不含有其他杂质的核酸水溶液,用于核酸扩增。
2、根据权利要求1的方法,其中所述核酸为DNA或RNA。
3、根据权利要求1的方法,其中采用抽吸装置完成抽吸操作。
4、根据权利要求3的方法,其中所述的抽吸装置为一次性注射器或塑料泡。
5、根据权利要求1-4的任何一种的方法,其中裂解液是异硫氰酸胍溶液,裂解液与临床样本的体积比为1-2∶1,洗脱液是10mM的Tris-HCL。
6、根据权利要求5的方法,其中裂解液与临床样本的体积比为1∶1。
7、根据权利要求1-4的任何一种的方法,其中所述过滤膜选自硅胶膜。
8、实施权利要求1-7的任何一种方法的微量临床样本核酸快速提取试剂盒,其包括微量临床样本核酸快速提取装置、细胞裂解液、清洗液及洗脱液,其中提取装置由尖口吸管(1)、过滤器(2)、抽吸装置(3)组成。
9、根据权利要求8的试剂盒,其中所述抽吸装置(3)是一次性注射器或塑料泡。
10、根据权利要求8或9的试剂盒,其中所述过滤器(2)选自硝硅胶膜过滤器。
11、权利要求8-10中任何一项所述的试剂盒在传染病病原体、宿主或病原体基因突变和单核苷酸多态性检测中的用途。
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