[发明专利]具有高纯度X-染色体和Y-染色体的精子群有效
| 申请号: | 200810166001.8 | 申请日: | 2001-05-09 |
| 公开(公告)号: | CN101418280A | 公开(公告)日: | 2009-04-29 |
| 发明(设计)人: | 肯尼思·M·埃文斯;埃里克·B·范·芒斯特 | 申请(专利权)人: | XY公司 |
| 主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06;C12Q1/68;C12Q1/02;G01N15/14;G01N21/17;G01N33/487;G01N33/50;C12M3/00;C12M1/34 |
| 代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 | 代理人: | 丁香兰 |
| 地址: | 美国科*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 纯度 染色体 精子 | ||
1.一种区分精子细胞的方法,该方法包括步骤:
a.收集来自雄性哺乳动物物种的精子细胞;
b.在流式细胞仪内建立液流;
c.将所述精子细胞引入所述液流;
d.针对检测器,定向所述精子细胞;
e.检测发射自结合到所述精子细胞上的光发射材料的荧光之 间的差别,所述荧光对于所述精子细胞针对所述检测器的取向具有不 同响应;
f.将所述发射自结合到所述精子细胞上的光发射材料的荧光 转化成为至少一种含有关于所述精子细胞的取向的信息的信号;
g.分析所述信息;和从所述分析确定所述精子细胞针对所述 检测器的所述精子细胞的取向;
h.形成多个夹带有一个所述精子细胞的液滴;
i.根据所述精子细胞的核DNA的量,使每一个所述液滴带上 不同的电荷;
j.偏转每一个所述液滴;
k.根据所述液滴的电荷收集每一个所述液滴;以及
l.产生带X-染色体的精子细胞群和带Y-染色体的精子细胞 群。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述的液流包括鞘液。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述的检测器包括一个光电倍增 管。
4.如权利要求1所述的方法,其中所述的分析所述信息的步骤包括 步骤:
a.经过一段时间绘制电子信号图;
b.对相应于所述电子信号的图的面积求积分;以及
c.将所述图的积分当作定向的精子细胞的集合。
5.如权利要求1所述的方法,其还包括,根据确定的所述精子细胞 针对所述检测器的取向,通过使所述精子细胞指向一个或多个收集容器 而区分收集所述精子细胞。
6.如权利要求1所述的方法,其中针对检测器,定向所述精子细胞 的步骤包括由定向喷嘴在所述精子细胞经过光电倍增管前面时通过液压 动力迫使扁平的精子头部取向正确。
7.如权利要求1所述的方法,其中所述的形成多个夹带有一个所述 精子细胞的液滴的步骤包括,形成的液滴具有足够的大小以包封所述精 子细胞,其中所述的精子细胞包括一个完整的具有尾部的活精子细胞。
8.如权利要求1所述的方法,其还包括,将所述液流从具有管口的 喷嘴中喷射出来的步骤,其中所述的管口的直径为100微米。
9.如权利要求8所述的方法,其中所述的带X染色体的精子细胞群 和所述的带Y染色体的精子细胞群的纯度为选自由90%到100%之间, 91%到100%之间,92%到100%之间,93%到100%之间,94%到100%之 间,95%到100%之间,96%到100%之间,97%到100%之间,98%到100% 之间,和99%到100%之间所组成的组。
10.如权利要求8所述的方法,其还包括,建立可分离事件的速率 的步骤,其中所述的可分离事件的速率是选自由每秒至少5000个可分离 事件,每秒至少6000个可分离事件,每秒至少7000个可分离事件,每 秒至少8000个可分离事件,每秒至少9000个可分离事件,每秒至少10,000 个可分离事件,每秒至少11,000个可分离事件,每秒至少12,000个可分 离事件,每秒至少13,000个可分离事件,每秒至少14,000个可分离事件, 每秒至少15,000个可分离事件,每秒至少16,000个可分离事件,每秒至 少17,000个可分离事件,每秒至少18,000个可分离事件,每秒至少19,000 个可分离事件,每秒至少20,000个可分离事件,和每秒至少21,000个可 分离事件所组成的组。
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