[发明专利]三角帆蚌酶解多肽及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及医药及保健食品及其制备和应用，具体为三角帆蚌酶 解多肽(MPP)及其制备和应用，特别是在增强免疫力功能方面的应用。

背景技术

三角帆蚌(hyriopsis cumingii)，属软体动物门，瓣鳃纲真瓣鳃目，珠蚌科。据《本草纲 目》记载：蚌肉味甘、性咸、无毒；耳聪目明，使人肌肤润泽，精力旺盛，不易衰老。蚌肉 作为珍珠产业的下脚料，资源十分可观，蛋白质含量占干物质的80％。但是，由于其肉质粗 韧，土腥味重难以食用，育珠后的蚌肉被作为废弃物丢弃或烘干用作饲料，不仅经济附加值 低，同时还严重污染环境。据报道，由食物蛋白酶解制得的多肽具有降血压、抗肿瘤、免疫 调节、抗菌等的生物学活性。多肽是一类结构相对简单的小分子物质，是构成及发挥作用的 活性蛋白质的结构片段。从营养角度评价，多肽被人体消化吸收的效率要比同一组成的氨基 酸高。此外，多肽的风味一般要优于单个氨基酸，也不易产生过敏。因此，充分运用现代食 品生物技术对其进行深度开发利用，开发具有生物学活性的肽类物质，不仅能提高整个珍珠 产业的经济价值，而且还能带来丰厚的社会效益。目前，有三个公开专利报道了相关的蚌肉 产品。专利公开号CN101066086A公开了一种碱提酸沉提取三角帆蚌蛋白的方法，专利公开号 CN101248866A为一种采用新鲜蚌肉为原料，在常温下放置，压滤得蚌肉提取物、蚌肉渣酶解 的多肽取得三种物质的方法，此工艺蚌肉多糖提取并不完全，得率偏低，且肉渣常温放置易 变质，专利公开号CN1517099A公开一种具有镇痛和抑制肿瘤作用的蚌类提取物制备方法，采 用酸、醇、碱或自溶方法获得蚌肉得取物的药物组合物，但所需时间长，防腐难、难溶解， 有酸碱排放对环境有污染。

发明内容：

本发明的目的是，提供一种三角帆蚌酶解多肽及其制备方法，并提供其在医药或保健食 品中的应用。

本发明的三角帆蚌酶解多肽(MPP)，其来源于酶解的三角帆蚌，所述酶解方法如下：

(1)将新鲜蚌肉捣碎后打成浆状，按质量比加入5-6倍量的水，混合后煮沸15-20分钟， 过滤，收集沉淀，将沉淀干燥脱脂得到蚌肉蛋白粉；

(2)将蚌肉蛋白粉加6-8重量倍的水充分浸泡11-12小时，超微粉碎均浆，调整pH 至8.0-9.0；

(3)按蚌肉蛋白粉中的蛋白含量计，加入0.3％-0.6％的碱性蛋白酶，在40-60℃条件下 酶解4-6小时，85-90℃灭酶15分钟；

(4)将酶解液离心去沉淀，上清夜浓缩干燥后得到三角帆蚌酶解多肽；

(5)测定三角帆蚌酶解多肽总蛋白≥80％，其中天门冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸、赖氨 酸及精氨酸含量≥50％，分子质量主要集中于6,100Da和26,200Da两个区域。

本发明所述三角帆蚌酶解多肽可以应用于制备促进T淋巴细胞增殖的药物，以及制备 增强免疫力的保健食品。

上述发明方案进一步叙述如下：

原料采用普通三角帆蚌或采珠后的三角帆蚌，取出新鲜的蚌肉，将其捣碎并打成浆状， 以1∶5-6(质量比)加水混合，煮沸15-20min，趁热过滤，取走上清(大部分为蚌肉多糖)， 沉淀经过干燥脱脂后，得到蚌肉蛋白粉，加入适量水充分浸泡12小时左右，超微粉碎均浆， 调整pH至8.0-9.0(粉水比控制在1∶6-8)，以0.3％-0.6％(用蛋白含量计算)的酶量加入碱 性蛋白酶(Alcalase)，在40-60℃反应4-6小时，85-90℃灭酶15分钟，离心，上清夜浓缩干 燥后得到三角帆蚌酶解多肽(MPP)。

体外免疫实验结果表明，该多肽不仅能促进T细胞致有丝分裂原刀豆蛋白A(Con A) 诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应，而且在无致有丝分裂原诱导下，也能显著增强小鼠脾淋巴 细胞增殖反应。

试验说明，按本发明方法制备的三角帆蚌酶解多肽(MPP)可以应用于制备增强免疫 力的药物或保健食品。