[发明专利]一种三疣梭子蟹快速生长品系的构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及水产遗传育种领域，具体说是一种三疣梭子蟹快速生长品 系的构建方法。

背景技术

水产动物的遗传育种传统上采用群体选育或杂交的方法进行，目前也 有尝试借鉴在蓄禽中采用的家系选育的方法。由于一般水产动物产卵量大、 后代数量多，使家系选育非常繁琐，操作困难。群体选育耗时长，收效慢。 近年来，国内外学者一直非常关注分子标记辅助育种，但在实际应用中尤 其在水产动物的遗传育种上还未见成效。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速、有效并且操作简便的三疣梭子蟹快 速生长品系的构建方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

三疣梭子蟹快速生长品系的构建方法：利用选育材料的基因组微卫星 作为分子标记，根据分子标记得到遗传结构中存在生殖隔离明显的群体作 为杂交群体，杂交群体进行杂交组合，即得三疣梭子蟹快速生长品系。

所述选育材料的基因组微卫星作为分子标记为以选育材料的基因组 DNA为模板，以上游引物5’-CTGTCTGATGAG TGAGGCTAC-3’和下游引物5’ -TGACCACGAGGAAAGGAG-3’以及上游引物5’-GCCACTATCTTGCTGAGGTTGA-3’ 和下游引物5’-GCCATAGCACGAACACTTTTGA-3’两对引物进行体外双重PCR 扩增，获得选育材料的基因组微卫星序列片段，选育材料为三疣梭子蟹野 生群体。所述PCR扩增时PCR总反应体积为25uL，其中含dNTP(10mM)0.5ul， 每个引物0.2Fmol，0.4U Taq酶，10×PCR Buffer2.5ul(含1.5mmol Mgcl₂)。 PCR扩增条件：94℃ 2min；然后94℃ 30s，57℃ 30s，72℃ 40s，循环29 次；最后72℃ 10min。所述选育材料遗传结构中存在生殖隔离明显的杂交 组合群体为雄体为山东莱州湾群体、雌体为广东南澳岛群体。

本发明所具有的优点：

1.本发明育种的遗传背景清晰，避免了传统育种的盲目性。利用基因 组微卫星作为分子标记，解析了我国野生三疣梭子蟹群体的遗传结构，明 确了各地理种群间的遗传关系，使育种材料的选择具有更强的目的性，并 且采用分子标记辅助选育和杂交并行的方法构建三疣梭子蟹快速生长品 系，加快了育种进程，也提高了育种的有效性。。

2.本发明以遗传上显示生殖隔离的两个群体-山东莱州湾群体和广东 南澳岛群体作为杂交的基本材料，在有效利用遗传资源的同时，也有效缓 解了由于小群体繁殖造成的近交衰退现象。

3.本发明杂交组合的父本为山东莱州湾群体的雄性个体，借鉴了家蓄 中先进的育种经验，充分考虑了父本性状在育种中的重要作用。

4.本发明方法大大减少了选育环节，加快了育种进程，同时有效避免 了小群体繁殖造成的近交衰退现象，尤其适合于生长特性的选育。

附图说明

图1a为本发明选育材料基因组微卫星标记显示三疣梭子蟹山东莱州湾 群体的遗传结构。

图1b为本发明选育材料基因组微卫星标记显示三疣梭子蟹广东南澳岛 群体的遗传结构。

图2a为本发明构建的三疣梭子蟹杂交组合子代与野生群体的生长性状 比较图(其中黑色柱形图示杂交组合(♂山东莱州湾×♀广东南澳岛)子 代)。

图2b为本发明构建的三疣梭子蟹杂交组合子代与野生群体的生长性状 比较图(其中黑色柱形图示杂交组合(♂山东莱州湾×♀广东南澳岛)子 代)。

具体实施方式

实施例1