[发明专利]发酵废弃蔬菜饲料和制备方法

权利要求书

1.一种发酵废弃蔬菜饲料，其特征是由混合原料和微生物活菌液组成，混合原料由蔬菜废弃物、秸秆和玉米粉组成，蔬菜废弃物采用大白菜、卷心菜、花椰菜、小白菜或菠菜的废弃菜叶，秸秆采用玉米秆、小麦秆、水稻秆、高粱秆、花生秧或山芋秧，混合原料每吨按重量配比组成(w/w)：废弃蔬菜70-75％，秸秆20-25％，玉米粉4-6％，每吨混合原料加入微生物活菌液30-40毫升，每毫升微生物活菌液中按体积比各含：凝结芽孢杆菌20-30％、嗜酸乳杆菌20-25％、植物乳杆菌15-25％、短乳杆菌15-25％、产朊假丝酵母15-25％；微生物活菌液每毫升的活菌含量为1.0×10⁹cfu/ml～1.0×10¹¹cfu/ml，该饲料的制作方法为：微生物活菌液采用凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌和产朊假丝酵母，微生物活菌的制备按以下步骤：

(1)斜面菌种培养：各菌种使用相应培养基并加入1.5-2.5％琼脂，在30-40℃条件下静止培养20-48小时，放入4℃冰箱保存；

(2)液体一级种子培养：为摇瓶培养，取250ml三角瓶加入种子培养基50-100ml，取斜面种子接入培养基中30-40℃，100-220rpm，培养30h；

(3)液体二级培养：10L自动种子发酵罐，装种子培养基5-8L，接种量(V/V)5-10％，30-40℃，搅拌速度50-100转/分钟，培养30h；

(4)各发酵罐单菌株纯培养条件：温度25-40℃，通风量9-13m³/h，罐压0.02-0.09MPa，接种量(V/V)1.5-7.5％，时间19-72小时，发酵液活菌数达到10⁹cfu/ml；

各菌种的种子培养基和发酵培养基成分以每升水中加入量计算：

凝结芽孢杆菌：蛋白胨5-15g，酵母膏5-15g，葡萄糖3-9g，MgSO₄·7H₂O0.5-1.5g，K₂HPO₄1-3g，MnSO₄50μg，pH7.0；

嗜酸乳杆菌：胰蛋白胨2.5-7.5g，蛋白胨5-15g，葡萄糖5-15g，乳糖2.5-7.5g，酵母浸出粉4-10g，pH7.0；

植物乳杆菌：蛋白胨5-15g，牛肉膏5-15g，酵母膏3-7g，葡萄糖15-25g，柠檬酸二钠1.5-3.5g，K₂HPO₄1-3g，醋酸钠2.5-7.5g，MgSO4·7H₂O1-3g，MnSO₄·4H₂O0.01g，吐温10ml，pH6.0-6.5；

短乳杆菌：胰蛋白胨3.5-6.5g，蛋白胨7.5-12.5g，葡萄糖7.5-12.5g，乳糖2.5-7.5g，酵母浸出粉5-9g，pH7.0；

产朊假丝酵母：葡萄糖15g-45g，酵母粉5g-15g，蛋白胨5g-15g，(NH₄) ₂SO₄5g-15g；

活菌含量分别为：凝结芽孢杆菌为1.0×10¹¹cfu/ml，嗜酸乳杆菌为1.0×10¹¹cfu/ml，植物乳杆菌为1.0×10¹¹cfu/ml，短乳杆菌微胶囊为1.0×10¹¹cfu/ml，产朊假丝酵母为1.0×10⁹cfu/ml，发酵饲料成品性状：颜色深绿色有浓郁酸香和酯香味，质地柔软多汁，适口性强。

2.一种发酵废弃蔬菜饲料的制备方法，其特征是所述发酵废弃蔬菜饲料由混合原料和微生物活菌液构成，将微生物活菌液加入混合原料，经密 封发酵制成成品；混合原料由蔬菜废弃物、秸秆和玉米粉组成，蔬菜废弃物采用大白菜、卷心菜、花椰菜、小白菜或菠菜的废弃菜叶，秸秆采用玉米秆、小麦秆、水稻秆、高粱秆、花生秧或山芋秧，蔬菜废弃物采用锤片式粉碎机粉碎，秸秆采用铡草机切割成长2-3cm小段，混合原料每吨按重量配比组成(w/w)：废弃蔬菜70-75％，秸秆20-25％，玉米粉4-6％，每吨混合原料加入微生物活菌液30-40毫升，每毫升微生物活菌液中按体积比各含：凝结芽孢杆菌20-30％、嗜酸乳杆菌20-25％、植物乳杆菌15-25％、短乳杆菌15-25％、产朊假丝酵母15-25％；微生物活菌液每毫升的活菌含量为1.0×10⁹cfu/ml～1.0×10¹¹cfu/ml，该饲料的制作方法为：微生物活菌液采用凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、短乳杆菌和产朊假丝酵母，微生物活菌的制备按以下步骤：

(1)斜面菌种培养：各菌种使用相应培养基并加入1.5-2.5％琼脂，在30-40℃条件下静止培养20-48小时，放入4℃冰箱保存；

(2)液体一级种子培养：为摇瓶培养，取250ml三角瓶加入种子培养基50-100ml，取斜面种子接入培养基中30-40℃，100-220rpm，培养30h；

(3)液体二级培养：10L自动种子发酵罐，装种子培养基5-8L，接种量(V/V)5-10％，30-40℃，搅拌速度50-100转/分钟，培养30h；

(4)各发酵罐单菌株纯培养条件：温度25-40℃，通风量9-13m³/h，罐压0.02-0.09MPa，接种量(V/V)1.5-7.5％，时间19-72小时，发酵液活菌数达到10⁹cfu/ml；

各菌种的种子培养基和发酵培养基成分以每升水中加入量计算：

凝结芽孢杆菌：蛋白胨5-15g，酵母膏5-15g，葡萄糖3-9g，MgSO₄·7H₂O0.5-1.5g，K₂HPO₄1-3g，MnSO₄50μg，pH7.0；

嗜酸乳杆菌：胰蛋白胨2.5-7.5g，蛋白胨5-15g，葡萄糖5-15g，乳糖2.5-7.5g，酵母浸出粉4-10g，pH7.0；

植物乳杆菌：蛋白胨5-15g，牛肉膏5-15g，酵母膏3-7g，葡萄糖15-25g，柠檬酸二钠1.5-3.5g，K₂HPO₄1-3g，醋酸钠2.5-7.5g，MgSO4·7H₂O1-3g，MnSO₄·4H₂O 0.01g，吐温10ml，pH6.0-6.5；

短乳杆菌：胰蛋白胨3.5-6.5g，蛋白胨7.5-12.5g，葡萄糖7.5-12.5g，乳糖2.5-7.5g，酵母浸出粉5-9g，pH7.0；

产朊假丝酵母：葡萄糖15g-45g，酵母粉5g-15g，蛋白胨5g-15g，(NH₄) ₂SO₄5g-15g；

活菌含量分别为：凝结芽孢杆菌为1.0×10¹¹cfu/ml，嗜酸乳杆菌为1.0×10¹¹cfu/ml，植物乳杆菌为1.0×10¹¹cfu/ml，短乳杆菌微胶囊为1.0×10¹¹cfu/ml，产朊假丝酵母为1.0×10⁹cfu/ml；

混合原料内按比例加入微生物菌液，经过充分搅拌均匀，真空包装，10-35℃发酵7-30天，成品检验，发酵饲料成品性状：颜色深绿色有浓郁酸香和酯香味，质地柔软多汁，适口性强，成品入库。