[发明专利]一种快速诊断唐氏综合征的方法

权利要求书

1、一种快速诊断唐氏综合征的方法，其特征在于所述方法包括：

(1)用常规方法采集样本，于-20℃保存备用；所述样本是羊水样本、绒毛样本或外周血样本；

(2)提取样本中的DNA，其中：

外周血样本采用DNA提取试剂盒进行DNA提取；

羊水样本或绒毛样本采用盐析法进行DNA提取；

(3)选择与合成引物，其中：

a.D21S1440引物序列：

f-FAM-GAGTTTGAAAATAAAGTGTTCTGC；

r-CCCCACCCCTTTTAGTTTTA；

扩增产物为157～175bp；

b.D21S11引物序列：

f-FAM-GTGAGTCAATTCCCCAAG；

r-GTTGTATTAGTCAATGTTCTCC；

扩增产物为172～260bp；

c.Penta D引物序列：

f-FAM-GAAGGTCGAAGCTGAAGTG；

r-CTTGTGTCCAGATTAAAGAATTCTT；

扩增产物为398bp～433bp；

(4)PCR扩增

以提取的基因组DNA为模板，在9600PCR仪上进行扩增；反应体系为25μL～50μL，其中模板0.2～0.4μL其终浓度0.6ng，dNTPs 0.5μL～1.0μL其终浓度0.2mmol/L，Taq酶0.5μL～1.0μL其终浓度0.04U/μL，10×PCR buffer 2.5μL～5.0μL其终浓度1×PCR buffer，引物f-FAM 0.03μL～0.06μL其终浓度0.12μmol/L，引物r 0.03μL～0.06μL其终浓度0.12μmol/L，最后补充ddH₂O至25μL～50μL；

(5)PCR扩增产物的检测

采用ABI PRISM 377测序电泳、GeneScan 3.1软件及核酸/蛋白凝胶图像分析管理系统分析扩增产物，对电泳条带进行峰面积定量检测。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述PCR扩增条件如下：

预变性：93℃～95℃2min；变性93℃～95℃30s，退火58℃～62℃30s，延伸72℃1min共32个循环；延伸72℃5min后60℃保温30min，4℃保存。

3、一种权利要求1所述的快速诊断唐氏综合征的方法，用以联合应用诊断唐氏综合征。