[发明专利]一种肝细胞和枯否细胞的体外共同培养技术

权利要求书

1.一种肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征是将肝细胞和Kupffer接种于含80-120ml/L小牛血清，110-135u/L胰岛素，90-110μg/L胰高血糖素，90-110μg/L氢化可的松，1.0-3.0g/L NaHCO3，8-120万U/L青霉素的pH为7-7.5的DMEM培养基的培养板上，置于恒温37℃，5％二氧化碳培养箱中培养，培养24h后倒去培养上清，用培养液冲洗，每天换液；其中肝细胞和Kupffer细胞数量比在9-15:1之间。

2.如权利要求1所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征是将肝细胞和Kupffer接种于含100ml/L小牛血清，125u/L胰岛素，100μg/L胰高血糖素，100μg/L，氢化可的松，2.0g/L NaHCO3，10万U/L青霉素的pH为7.2的DMEM培养基的培养板上，置于恒温37℃，5％二氧化碳培养箱中培养，培养24h后倒去培养上清，用培养液冲洗，每天换液。

3.如权利要求2所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于肝细胞和Kupffer细胞数量比在10-14:1之间。

4.如权利要求3所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于肝细胞和Kupffer细胞数量比在11-13:1之间。

5.如权利要求4所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于肝细胞和Kupffer细胞比例在12:1。

6.如权利要求5所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于肝细胞和Kupffer细胞为哺乳动物的肝细胞和Kupffer细胞。

7.如权利要求6所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于哺乳动物为乳猪、乳牛或人。

8.如权利要求7所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于乳猪肝细胞和Kupffer细胞数量比为在9-15:1之间。

9.如权利要求8所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于乳猪肝细胞和Kupffer细胞数量比为在10-14:1之间。

10.如权利要求9所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于乳猪肝细胞和Kupffer细胞数量比为在11-13:1之间。

11.如权利要求10所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术，其特征在于乳猪肝细胞和Kupffer细胞数量比为12:1。

12.权利要求1-11任一所述的肝细胞和Kupffer细胞的体外共同培养技术在构建生物型人工肝支持系统中的应用。