[发明专利]一种中药微粉细胞破壁率的测定方法无效
申请号: | 200810143609.9 | 申请日: | 2008-11-14 |
公开(公告)号: | CN101403738A | 公开(公告)日: | 2009-04-08 |
发明(设计)人: | 蔡光先;杨瑛;杨永华;李雅;温俊达 | 申请(专利权)人: | 湖南省中医药研究院 |
主分类号: | G01N33/48 | 分类号: | G01N33/48 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 | 代理人: | 卢 宏 |
地址: | 410006*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 中药 细胞 破壁率 测定 方法 | ||
1、一种中药微粉细胞破壁率的测定方法,其特征在于,应用显微观测计数法,测定中药微粉的细胞破壁率;根据中药不同入药部位选择适宜的细胞类型,即特征细胞作为测定观测对象;选择原则为:有规则的细胞形状,易于观察与计数;细胞壁较厚,比较坚韧难破,对其种类有代表性。
2、根据权利要求1所述的中药微粉细胞破壁率的测定方法,其特征在于根据不同入药部位种类中药,选择观测的细胞如下:根及根茎类:首选木栓细胞,次选薄壁细胞,或选石细胞;皮类:木栓细胞;花类:花粉粒;叶类:表皮细胞;果实类:首选果皮细胞,次选表皮细胞,或选石细胞。
3、根据权利要求2所述的中药微粉细胞破壁率的测定方法,其特征在于,具体实施包括以下步骤:
1)取中药样品干燥,按常规方法制备中药细粉和微粉;
2)在0.05~1.5g范围内称取5-8个不同重量的步骤1)所述细粉,均匀分散于溶媒中,按显微观测计数法观察细粉中完整的特征细胞为显微计数物,并进行线性回归,绘制标准曲线,得回归曲线方程,反复进行此步骤至回归曲线方程中相关系数r大于0.9,再进行下一步;
3)分别按照步骤2)所述方法称取步骤1)所述微粉和细粉,按显微观测计数法观察其中完整的特征细胞为显微计数物,按下列公式计算细粉和微粉的显微特征细胞个数:
其中,X为每个视野内的特征细胞数,V为药液总体积,V′为盖玻片下药液体积,W为样品称取量;
4)根据样品细粉和微粉的显微特征细胞个数,按下列公式计算细胞破壁率:
Y=(A-B)/A×100%,
其中,Y为细胞破壁率,A为细粉显微特征细胞个数,B为微粉的显微特征细胞个数。
4、根据权利要求3所述的中药微粉细胞破壁率的测定方法,其特征在于,步骤1)所述中药样品干燥为水分低于6%;所述常规方法制备中药细粉和微粉是将中药样品粉碎成80-100目的细粉,再将细粉进行超微粉碎至过300目的微粉。
5、根据权利要求1至4之一所述的中药微粉细胞破壁率的测定方法,其特征在于,所述溶媒为水合氯醛或稀甘油。
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