[发明专利]用质谱检测多发性骨髓瘤特征蛋白的试剂

权利要求书

1.一种检测试剂盒，其特征在于：含有能与特异蛋白质结合的磁珠基质， 所述磁珠是可吸附样品中蛋白质的WCX阴离子基质磁珠或C8及C18疏水基质 磁珠；

含有试剂盒操作方法的说明书；

含有阳性对照与阴性对照，所述对照可用激光解吸/电离飞行时间质谱仪 进行分析；

检测试剂盒中包括多发性骨髓瘤患者与正常人、多发性骨髓瘤相鉴别的 患者两两鉴别的血清特征蛋白检测质谱模型，所述质谱模型包括选自56个特 征蛋白中任意两个或两个以上的蛋白，所述阳性对照是将待检样品中相应蛋 白质的质荷比及该蛋白的临界峰值均值M与特征蛋白逐一进行对比分析；

所述特征蛋白质荷比m/z和临界峰值均值M分别为m/z＝8139，M≤5.88； m/z＝11682，M≤0.78；m/z＝22778，M≤0.64；对于单克隆免疫球蛋白疾病κ 组和λ组分型，在多发性骨髓瘤κ类型m/z＝6191，M＞5.20，λ类型m/z＝6191， M≤5.20；

质荷比m/z误差＜0.01％，临界峰值均值M的变异系数CV＜5～10％。

2.人体血清样品中特异蛋白的试剂的制备方法，其特征在于包括以下 步骤：

1)4℃条件下2小时内收集多发性骨髓瘤患者和健康人的两组血清样品， 在-80℃低温冷冻备用；

2)采用WCX阴离子基质磁珠或C8及C18疏水基质磁珠对所述两组血清 样品的蛋白进行吸附；

3)用337nm氮激光仪和80cm或120cm飞行管分析阵列的激光解吸/ 电离飞行时间质谱仪对结合在表面的WCX阴离子基质磁珠或C8及C18疏水 基质磁珠上的两组血清蛋白进行读取，由此获得两组蛋白质谱图谱；

4)在每次实验数据收集前，用标准蛋白及质谱的标准化质控O型血清样 品校正仪器，使质荷比m/z误差＜0.01％和临界峰值均值M的变异系数CV＜ 5～10％，并精确地、定量地收集多发性骨髓瘤患者和正常人优化的血清质谱 图谱数据；

5)对所得数据进行统计学处理，根据多发性骨髓瘤患者和正常人两组血 清样品之间蛋白峰的差异，检测出两组血清蛋白质谱图谱之间有56个稳定 的差异蛋白及其临界峰值；

6)将待检样品中相应蛋白质的质荷比及该蛋白的临界峰值均值M与特 征蛋白逐一进行对比分析，所述特征蛋白质荷比m/z和临界峰值均值M分别 为m/z＝8139，M≤5.88；m/z＝11682，M≤0.78；m/z＝22778，M≤0.64；对于 单克隆免疫球蛋白疾病κ组和λ组分型，在多发性骨髓瘤κ类型m/z＝6191， M＞5.20，λ类型m/z＝6191，M≤5.20；质荷比m/z误差＜0.01％，临界峰值 均值M的变异系数CV＜5～10％。