[发明专利]运用重组多表位肽蛋白进行钩端螺旋体感染检测的方法

权利要求书

1.一种运用重组多表位肽蛋白进行钩端螺旋体感染检测的方法。其特征在于，采用钩端螺旋体外膜蛋白优势抗原决定簇的重组多表位肽为检测抗原构建试剂盒或试纸条，检测钩端螺旋体抗体IgM或IgG。

2.根据权利要求1所述的一种运用重组多表位肽蛋白进行钩端螺旋体感染检测的方法，其特征在于，它包括以下步骤：

(1)筛选钩端螺旋体外膜蛋白OmpL1、LipL21和LipL32的优势抗原表位；

(2)根据筛选的表位序列及表达系统的偏爱性，人工合成DNA序列并采用基因工程手段获得目的蛋白的编码基因；

(3)将合成的基因片段克隆到表达载体中并构建表达该目的蛋白的表达系统；

(4)根据表达系统的特点选用一定的纯化方法提纯目的蛋白并获得高纯度的产品；

(5)对所述步骤(4)获得的重组蛋白进行SDS-PAGE分析，确定具有22kD分子量的特定蛋白存在；对目标蛋白进行Western Blot分析，确定所获得蛋白的免疫反应性。

(6)以获得的重组蛋白为抗原，构建ELISA检测试剂盒或试纸条，检测目标样品中抗钩体IgG或IgM的存在情况而实现对钩体病人的检测。

3.根据权利要求1所述的一种运用重组多表位肽蛋白进行钩端螺旋体感染检测的方法，其特征在于，所述的目标样品为人或动物的血清、脑脊液等所有已经脱离人体或动物体的体液样品。

4.权利要求1所述的一种运用重组多表位肽蛋白进行钩端螺旋体感染检测的方法，其特征在于，所述的用于钩端螺旋体感染检测的方法是在体外进行的。