[发明专利]衣原体蛋白酶体样活性因子的活性片段及其表达方法

说明书

技术领域

本发明涉及衣原体蛋白酶体样活性因子的活性片段及其表达方法。

背景技术

衣原体是自然界中传播很广泛的病原体。它是既不同于细菌也不同于病毒的一种微生物，专营寄生在真核细胞内。衣原体广泛寄生于人类、哺乳动物及禽类。根据衣原体的抗原结构和DNA同源性的特点，将衣原体属(Chlamydiae)分为四个种，包括沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis)、肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae)、鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsittaci)和兽类衣原体(Chlamydiapecorum)。与人类疾病有关的衣原体有三种，分别是鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体和肺炎衣原体。目前由衣原体感染所致的性传播疾病增加很快，生殖道感染的发病率已超过淋病奈瑟菌感染，成为最常见的性传播疾病。这三种衣原体均可引起肺部感染。

衣原体对宿主细胞的毒性作用一般认为是通过CPAF(chlamydialprotease/proteasome-like activity factor)蛋白来实现的：

衣原体为了能在受感染宿主细胞生存，进化出了逃避、以及应付宿主免疫识别的能力。其中一个策略就是衣原体通过抑制宿主主要组织相容性复合物(MHC)I类和II类抗原的表达从而逃脱T淋巴细胞的免疫识别(Zhong et al.，1999，2000)。现在已经找到分泌到宿主细胞质中的衣原体蛋白酶或蛋白酶体样活性因子CPAF(chlamydial protease/proteasome-like activity factor)，CPAF对降解宿主主要组织相容性复合物(MHC)的转录因子rfx5和上游刺激因子1(USF-1)不仅是足够的，而且是必须的(Zhong et al.，2001)。

抑制宿主受感染细胞凋亡是衣原体成功生存和繁殖所采用的另一个策略(Byrne and Ojcius，2004；Fan et al.，1998；Fischer et al.，2004；Greene etal.，2004；Miyairi and Byrne，2006)：已经证明衣原体通过降解BH3-only凋亡蛋白来抑制受感染宿主细胞的凋亡，最近研究表明CPAF也在此过程中发挥重要作用，研究发现CPAF能降解广谱的BH3-only前凋亡蛋白，例如Puma等(Pirbhai et al.，2006)。

除了降解rfx5、USF-1、BH3-only蛋白，CPAF还能降解细胞骨架中间纤维蛋白keratin 8，对衣原体蛋白CPAF此行为的解释是通过降解细胞骨架中间纤维蛋白keratin 8使得宿主细胞具有更好的流动性，有利于含有不断增殖衣原体的液泡的扩张；同时有利于受感染细胞的裂解从而衣原体得以继续感染新的细胞，吸收养分(Dong et al.，2004)。