[发明专利]一种高纯度活性真菌多糖的生产方法

说明书

一、技术领域

本发明属于生物工程领域，一种高纯度活性真菌多糖的生产方法。

二、技术背景

真菌多糖在国际上被称为“生物应答调节剂”，简称BRM，作为一种生物非特异性免疫促进剂，它具有提高免疫力、抗肿瘤、抗病毒、护肝排毒、抗溃疡、降低血糖、延缓衰老、抗辐射等功效。高纯度活性真菌多糖，作为原料可直接加工生产出剂型为软、硬胶囊、片剂、冲剂、注射针剂、水剂、口服液等产品。目前真菌多糖的提取常用水提取、酸提取、碱提取、超声波提取等工艺较烦琐、成本高、纯度含量较低、抗癌活性不高、无效成分较多、没有进行无效成分提纯，不能直接用于注射针剂、水剂产品的生产。

三、发明内容

本发明的目的就在于提供一种工艺简单、成本低、纯度含量较高、抗癌活性高、无效成分少、且能直接用于注射针剂、水剂产品的高纯度活性真菌多糖的生产方法。

本发明的目的是这样实现的，以大型真菌子实体、固体菌丝体和/或深层次发酵液菌丝体的粉末状干物质为原料，与上述原料重量2-6倍的纯净水混合，调整PH值至4后加温，当温度上升至40-50℃时加入由木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶组成的复合酶，一个小时后升温至60-70℃，此时用氢氧化钠调PH值至7-8，每分钟以1-10转搅拌，浸提2-4次，每次1-4小时，将2-4次浸提液合并过滤，减压浓缩至总体积30％时用乙醇沉淀、过滤得粗品。上清液用超过滤分离装置脱盐，经反复加水稀释和超过滤操作即得真菌多糖浓缩液，浓液经冷冻干燥或喷雾干燥得高纯度活性真菌多糖粉末。

上述生产方法中各参数的最佳值分别为：

加入粉末状原料的纯净水为粉末状原料重量的4倍；

复合酶各组分的含量分别是：木瓜蛋白酶为原料重量的1％-5％、果胶酶为原料重量的0.5％-1％、纤维素酶为原料重量的1％-2％。

每次浸提时间为2小时；

超滤膜分离装置采用截留分子量为30000-60000的膜分离装置；

超过滤的操作压力为0.05-0.08MPa；

超过滤操作室温度为18-22℃。

本发明复合酶配伍合理用量适当，它能够提高真菌多糖的浸出率主要是因为该复合酶对菌类物质中的游离蛋白质具有分解作用，使得菌类物质结构变松，它还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解掉，降低了它们与原料的结合力，它不但利于真菌多糖的浸出，还具有除蛋白质的作用，可减轻除蛋白质操作的负担，不会因除蛋白质而使真菌多糖损失过多。因此，它和现有技术中常用的水提方法相比提取效率高；和酸碱提取法相比不易破坏多糖的立体结构与活性；和超声波提取法相比不会造成将某些真菌多糖组分降解成了较小分子量的片段，从而降低抗癌活性。因此，本发明具有工艺简单、成本低、纯度及抗癌活性高、无效成分少的优点。

四、具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明：

实施例1

以大型真菌子实体的粉末状干物质为原料，与该原料重量2倍的纯净水混合，调整PH值至4后加温，当温度上升至50℃时加入由木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶组成的复合酶，一个小时后升温至60℃，此时用氢氧化钠调PH值至8，每分钟以1转搅拌，浸提4次，每次1小时，将4次浸提液合并过滤，减压浓缩至总体积30％时用乙醇沉淀、过滤得粗品。上清液用超过滤分离装置脱盐，经反复加水稀释和超过滤操作，即得真菌多糖浓缩液，浓缩液经冷冻干燥或喷雾干燥得多糖纯度达到98％以上真菌多糖粉末。作为原料可加工生产出剂型为软、硬胶囊、片剂、冲剂、注射针剂、水剂、口服液产品

实施例2

以固体菌丝体的粉末状干物质为原料，与上述原料重量6倍的纯净水混合，调整PH值至4后加温，当温度上升至40℃时加入由木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶组成的复合酶，一个小时后升温至70℃，此时用氢氧化钠调PH值至7，每分钟以10转搅拌，浸提2次，每次4小时，将2次浸提液合并过滤，减压浓缩至总体积30％时用乙醇沉淀、过滤得粗品。上清液用超过滤分离装置脱盐，经反复加水稀释和超过滤操作，即得真菌多糖浓缩液，浓缩液经冷冻干燥或喷雾干燥得多糖纯度达到99.6％以上真菌多糖粉末。作为原料可加工生产出剂型为软、硬胶囊、片剂、冲剂、注射针剂、水剂、口服液产品。

实施例3