[发明专利]同步分离提取与纯化荷叶中黄酮、生物碱和多糖的方法

权利要求书

1.一种同步分离提取与纯化荷叶中黄酮、生物碱和多糖的方法，其特征是工艺步骤如下：

(1)将新鲜荷叶用含0.1％NaCl、pH＝3.0-4.0的磷酸水溶液，常温浸泡3min，淋洗沥干后干燥，粉碎至18目-30目，微波预处理；

(2)将经微波处理后的荷叶干粉，加入25-30倍40％-70％的碱性有机溶液，调pH＝9.0-14.0，加入抗氧化剂0.1g/Kg-0.3g/Kg干荷叶，在65℃-85℃下浸提1-2小时，提取1次，以提取荷叶黄酮；

(3)将(2)中所得荷叶粉残渣，加入25-30倍60％-95％的酸性有机溶液，调pH＝1.0-6.0，加入抗氧化剂0.3g/Kg-0.5g/Kg干荷叶，在65℃-85℃下浸提1h-2h，提取2次，以提取荷叶生物碱；

(4)将(3)中所得荷叶粉残渣，加入25-30倍的中性水，调pH＝6.0-8.0，在65℃-85℃下浸提1h-2h，提取1次，以提取荷叶多糖；

(5)将(2)中所提取的荷叶黄酮粗提物，经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，用10％盐酸调溶液至pH＝6.5-7.0，再经离心、过滤，取上清液配制成1mg/mL-5mg/mL上样液，经弱极性大孔树脂吸附后用纯水、10％-30％乙醇分别冲洗除去杂质，50-90％有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度0.06Mpa-0.09Mpa、65℃-85℃下蒸发浓缩，回收浸提液中的有机溶剂，得到浓缩液，经真空干燥制得荷叶黄酮成品；

(6)将(3)中所提取的荷叶生物碱粗提物，经离心、过滤后的上清液，减压蒸馏回收乙醇后，经酸性溶液复溶，酸性条件下有机溶剂脱色，调节pH＝7.0后离心、过滤除去鞣质；取上清液，调节pH≥12.0，并配制成0.1mg/mL-2mg/mL上样液，经弱极性大孔树脂吸附后，用纯水、10％-30％乙醇分别冲洗除去杂质，50％-90％有机溶液洗脱，收集洗脱液，在真空度0.06Mpa-0.09Mpa、65℃-85℃下蒸发浓缩，回收浸提液中的有机溶剂，得到浓缩液，经真空干燥制得荷叶生物碱成品；

(7)将(4)中所提取的荷叶多糖粗提物，经离心、过滤后的上清液浓缩至糖浓度为2％-6％，调节pH＝6.0-7.0，保持溶液温度为40℃-60℃下条件下，经弱极性大孔树脂动态吸附脱色后，水洗出滞留于柱中的荷叶多糖，并浓缩至糖浓度4％-6％，用saveg除蛋白后，在真空度0.06Mpa-0.09Mpa、65℃-85℃下蒸发浓缩，得到浓缩液，经真空或冷冻干燥制得荷叶多糖成品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(2)所述的有机溶液为甲醇、乙醇或者正丁醇；抗氧化剂为特丁基对苯二酚、丁基羟基茴香醚或者二丁基羟基甲苯。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(3)所述的有机溶液为甲醇、乙醇或者正丁醇；抗氧化剂为D-异抗坏血酸或者D-异抗坏血酸钠。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(5)所述的有机溶液为甲醇、乙醇或者正丁醇；弱极性大孔树脂为AB-8、D101B、H-30或者H-60。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(6)所述的有机溶液为正已烷、氯仿、石油醚、甲醇、乙醇或者正丁醇；弱极性大孔树脂为D101、H-20、H-60、C004或者C008。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是步骤(7)所述的弱极性大孔树脂为AB-8、D208、LSA-5B、D4020、D201、S-8、NKA或者MG-1；saveg试剂配制用有机溶剂为氯仿、正丁醇或者戊醇。