[发明专利]一种检测单纯疱疹病毒I型IgM抗体的化学发光试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测单纯疱疹病毒I型IgM抗体的化学发光试剂盒，包含阴性、阳性对照品，抗人μ链单克隆抗体包被的固相载体，中和抗原，酶标记的单纯疱疹病毒I型抗体，化学发光底物液和浓缩洗涤液，其特征在于，所述的酶为碱性磷酸酶，所述的化学发光底物液含有1，2-二氧乙烷类衍生物。

2.根据权利要求1所述的化学发光试剂盒，其特征在于，所述的化学发光底物液含有(金刚烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3′-磷酰氧基)苯基-1、2-二氧乙烷(AMPPD)、3-(2′-(5＂-氯)螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3＂-磷酰氧基)苯-1，2-二氧杂环丁烷(CSPD)或3-(2′-(5＂-氯)螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3＂-磷酰氧基-5＂-氯)苯-1，2-二氧杂环丁烷(CDP-Star)。

3.根据权利要求1所述的化学发光试剂盒，其特征在于，所述的化学发光底物液含有：

Tris-HCl缓冲液                0.15～0.25mol/L

NaCl                          16％(w/v)

KCl                           0.4％(w/v)

防腐剂                        0.1％(v/v或w/v)

AMPPD、CSPD或CDP-Star         1.5～4.0％(v/v)，

其pH为7.0～7.5。

4.根据权利要求1所述的化学发光试剂盒，其特征在于，所述的化学发光底物液含有：

Tris-HCl缓冲液               0.15～0.25mol/L

NaCl                         16％(w/v)

KCl                          0.4％(w/v)

防腐剂                       0.1％(v/v或w/v)

AMPPD                        1.5～4％(v/v)，

其pH为7.0～7.5。

5.根据权利要求1所述的化学发光试剂盒，其特征在于，所述的化学发光底物液含有：

Tris-HCl缓冲液             0.20mol/L

NaCl                       16％(w/v)

KCl                        0.4％(w/v)

proclin300                 0.1％(v/v)

AMPPD                      2％(v/v)，

其pH为7.2。

6.根据权利要求1-5之任意一项所述的化学发光试剂盒，其特征在于，其中的浓缩洗涤液含有：

NaCl                   16％(w/v)

Tween-20               1％(v/v)

Tris-HCl缓冲液         0.2mol/L，

其pH为7.0～7.5。

7.检测单纯疱疹病毒I型IgM抗体的化学发光试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、阴性、阳性对照品的制备：阴性对照品，HSV-I IgM阴性人血清56℃ 1小时灭活，除菌过滤，冷冻保存；阳性对照品，已确定的高滴度HSV-IIgM阳性人血清，56℃ 1小时灭活后，用含10％(v/v)新生牛血清，0.1％(v/v)防腐剂，pH7.2的0.02mol/L Tris-HCl缓冲液稀释，稀释比例为1:150，冷冻保存；

B、酶标记的单纯疱疹病毒I型抗体的制备：单纯疱疹病毒I型抗体用戊二醛偶联法与碱性磷酸酶偶联，对0.01mol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲液充分透析，加入等体积甘油，-20℃以下保存备用；将酶标抗体用酶标记物用含0.1mol/L Tris-HCl缓冲液、0.5％(w/v)牛血清白蛋白(BSA)、0.1％(v/v)proclin 300、pH7.2～7.6的稀释液稀释，采用方阵法选择酶标抗体的稀释度为1:4000-1:6000；