[发明专利]甲型肝炎病毒IgM抗体化学发光免疫测定试剂盒及其制备方法

权利要求书

1、一种甲型肝炎病毒IgM抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

1)甲型肝炎病毒IgM抗体阴、阳性对照品；

2)包被的固相载体；

3)甲型肝炎病毒抗原液；

4)酶标记物；

5)上述酶所作用的化学发光底物；以及

6)浓缩洗涤液。

2、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为抗人-μ链抗体(单抗或多抗)直接包被的微孔板、塑料珠、塑料管或磁性颗粒。

3、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标记物为以碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的甲型肝炎病毒抗体(单抗或多抗)。

4、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物为1，2-二氧乙烷类衍生物、鲁米诺或异鲁米诺。

5、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物包括A液和B液，其中，

所述化学发光底物A液，包括10mM鲁米诺、0.3mM 4-羟基联苯、0.05mM 4-碘代苯基硼酸、0.2M pH8.7硼酸-硼砂缓冲液，其pH值为8.0～10.0；

所述化学发光底物B液，包括3.5mM过氧化脲、0.1％Tween20、0.2M pH7.2磷酸盐缓冲液，其pH值为7.0～7.6。

6、一种制备权利要求1所述试剂盒的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)以甲型肝炎病毒IgM抗体阴、阳性血清制备对照品；

2)以抗人-μ链抗体(单抗或多抗)直接包被固相载体；

3)以甲型肝炎病毒抗原制备抗原液；

4)以酶标记甲型肝炎病毒抗体(单抗或多抗)；

5)配制化学发光底物液；

6)配制浓缩洗涤液；

7)分装上述甲型肝炎病毒IgM抗体阴、阳性对照品、甲型肝炎病毒抗原液、酶标记的甲型肝炎病毒抗体、该酶所作用的化学发光底物和浓缩洗涤液；以及

8)组装为成品。

7、如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述包被固相载体的步骤2)采用以下方法：

1)包被

用0.1M pH值为9.0的磷酸氢二钾缓冲液配制成所需浓度的抗人-μ链抗体(单抗或多抗)包被液，并将包被液负载于固相载体上；

2)封闭

用含2％ BSA，0.01％明胶pH值为6.8～7.3，浓度为0.01M的磷酸盐缓冲液作为封闭液封闭上述的固相载体。

8、如权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述包被抗人-μ链抗体固相载体为微孔板、塑料珠、塑料管或磁性颗粒。

9、如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶；所述化学发光底物为1，2-二氧乙烷类衍生物、鲁米诺或异鲁米诺。

10、如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述1，2-二氧乙烷类衍生物为(金刚烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。