[发明专利]一步诱导枣叶片体细胞胚胎的方法无效
申请号: | 200810089510.5 | 申请日: | 2008-04-03 |
公开(公告)号: | CN101248763A | 公开(公告)日: | 2008-08-27 |
发明(设计)人: | 刘孟军;王娜;秦子禹;代丽 | 申请(专利权)人: | 河北农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;C12N5/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 071001河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一步 诱导 叶片 体细胞 胚胎 方法 | ||
1.一步诱导枣叶片体细胞胚胎的方法,其特征在于通过对冬枣叶片进行离体培养,不经过转换培养基即可一步实现愈伤组织诱导和胚状体分化。
2.按照权利要求1所述的方法,其特征在于包括以下培养步骤:
(1)选取生长健壮、苗龄为15-20天的冬枣组培苗叶片,在无菌操作台用已灭菌剪刀垂直叶脉剪切数刀。
(2)将经步骤(1)获得的冬枣离体叶片接种在MS+麦芽糖15~20g/L+TDZ5.0~10.0mg/L+AgNO31.0~2.0mg/L的培养基上进行暗培养,诱导15-20天时产生大量透明、淡黄色块状的愈伤组织,诱导20-30天时开始从块状愈伤组织表面逐渐突起成瘤状,逐渐分化出胚状体。
3.按照权利要求1所述的方法,其特征在于基本培养基为MS、含麦芽糖15~25g/L、琼脂3~5g/L、TDZ5.0~10.0mg/L、AgNO31.0~2.0mg/L,培养基灭菌前pH为5.5~6.0,培养温度控制在25~35℃。
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