[发明专利]一种牛乳中a－乳白蛋白含量的检测方法

权利要求书

1.一种检测a-乳白蛋白含量的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：1)将a-乳白蛋白溶于样品缓冲液，制备得到多个不同含量a-乳白蛋白的标准溶液，并对多个溶液分别检测后得到a-乳白蛋白含量与检测结果之间的标准曲线；2)对样品进行检测，并得到检测结果；3)将所述的检测结果与所述的标准曲线比对，得到样品中a-乳白蛋白的含量；其中，检测样品的设备是高压毛细管电泳分析仪。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中标准曲线的制定的方法如下：配制a-乳白蛋白标准溶液，在样品缓冲液中溶解a-乳白蛋白标准物质配制成分别为1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.1mg/ml、0.05mg/ml，制备得到标准溶液，摇匀后使用高压毛细管电泳分析，得到检测结果，即得到a-乳白蛋白含量与平均校正因子的关系曲线；其中，所述的检测结果按照如下方法计算：按峰面积计算出平均校正因子。

3.如权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：所述的标准溶液或待检测样品的处理方法为：把标准溶液或待检测样品装入离心管中，在2000-5000r/min离心条件下离心5-15min，将样品与缓冲液按照1∶4-10的比例加入冻存管，并摇匀，精确提取40ul处理样品加入样品管中，放置于超声波清洗机1～10min，使用毛细管电泳仪测定。

4.如权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于：所述的样品缓冲液为：能够使蛋白质分散的缓冲液，优选如下缓冲液：160mmol/L三甲基氨基甲烷缓冲液中加40mmol/L 3-吗啉代丙烷磺酸，60mmol/L乙二胺四乙酸，6mol/L尿素，处理样品时添加5ul/ml的β-巯基乙醇，甲基羟乙基纤维素0.4％，使用0.1M氢氧化钠调至pH值为8.5。

5.如权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于：所述的摇匀步骤采用漩涡混合器。

6.如权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：所述高压毛细管电泳分析的使用检测参数如下：毛细管电泳检测检测的温度控制在20～40℃之间，毛细管柱直径25～75μm、长度20～600mm，DAD(或紫外光)检测器，压力进样(或电动进样)，压力为0～1psi，进样时间为1s～20s，分离温度为20～40℃，工作电压为15～30kV。

7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述的毛细管柱为石英毛细管柱，包括涂层和未涂层。

8.如权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：所述的高压毛细管电泳分析的检测时电泳模式为区带电泳，其电泳缓冲液为pH3.0～8.0，主要成分为无机盐缓冲液，优选：磷酸盐、硼酸或柠檬酸。

9.根据权利要求2中所述的检测方法，其特征在于：所述的检测结果的处理方法如下：检测结果为样品分离的图谱，运用毛细管电泳仪所带的分析软件，积分各峰的面积，计算出试样浓度，再乘稀释倍数，即得实际浓度。