[发明专利]烷基胺硅胶毛细管整体柱及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种毛细管电色谱柱，尤其是烷基胺硅胶毛细管整体柱及其制备方法与应用。

背景技术

毛细管电色谱(CEC)是一种结合了高效液相色谱及高效毛细管电泳两大技术优势的新型分离分析方法，具有高效、高选择性、高分辨及快速分离的特点。CEC开辟了高效微分析领域的新途径而成为当代色谱学发展的一个新方向(罗国安，王义明，陈令新，梁琼麟，毛细管电色谱及其在生命科学中的应用.北京，2005，科学出版社)。

通常使用的电色谱柱为颗粒填充柱，该类柱的填充和塞子的制作十分复杂繁琐，而且塞子的存在被认为是填充柱产生气泡的原因，也正是两端塞子的稳定性影响了柱子的稳定性，这些因素正制约着电色谱的进一步发展。整体柱具有制备简单、内部结构均匀、通透性和重现性好、无需制备塞子等优点，被誉为新一代的色谱分离介质(E.Klodzínska，D.Moravcova，P.Janderab，B.Buszewski，J.Chromatogr.A2006，1109，51-59)。硅胶整体柱作为电色谱整体柱家族的一员，有其它整体柱无可比拟的优越性，如高的机械强度、良好的耐溶剂性能、耐高低温性能等，代表了电色谱的一种发展方向。

硅胶基质烷基键合固定相在毛细管电色谱分析中的应用最为广泛。目前，在毛细管电色谱实践中，超过半数采用的是非极性固定相(如C18和C8)以反相模式分离中性化合物，反相电色谱分离模式为极性和中性物质的分离提供了相当满意的分离效果(Klaus K.Unger；Marion Huber；Karin Walhagen；Tom P.Hennessy；Milton T.W.Hearn，Anal.Chem.2002，74，200A-2007A)，但是对于强极性和碱性化合物的分离分析却是一个挑战(Jing Dong，Junjie Ou，Xiaoli Dong，Renan Wu，Mingliang Ye，Hanfa Zou，J.Sep.Sci，2007，30，2986-2992)。对于强极性物质，因为在反相模式下，为了增加极性物质的保留，使用了含有大量缓冲盐水溶液的流动相，由于固定相表面不能与流动相充分润湿，容易在界面产生气泡，导致电渗流中断，实验失败。而对于碱性化合物，由于填料对碱性物质的强非特异性吸附，由此导致色谱峰拖尾严重，检测灵敏度下降。采取在流动相中加入三乙胺和乙二胺等添加剂可较好地改善色谱峰的对称性，但由于在流动相中添加竞争碱，会增加流动相的电导，从而增加焦耳热效应，使体系更容易产生气泡；而且由于竞争碱中和了部分硅羟基的负电荷，因此产生的电渗流也比较小。近年来，色谱工作者为改善极性和碱性化合物的电色谱分离分析，制备了各种改性硅胶键合相。如Shi等(Z.-G.Shi，Y.-Q.Feng，L.Xu，M.Zhang andS.-L.Da，Talanta，2004，63，593-598)用二氧化锆包覆硅胶整体柱，然后用磷酸盐和十八烷基磷酸修饰制得了峰对称性较好的电色谱整体固定相；Progent等(Frédéric Progent and Myriam Taverna，J.Chromatogr.A 2004，1052，181-189)采用包埋季胺阳离子的C21烷基键合相研究多肽的电色谱行为。Ding等(GuoshengDing，Zhenliang Da，Ruijuan Yuan，James J.Bao，Electrophoresis，2006，27，3363-3372)制备了一种反相-弱阴离子交换混合模式硅胶基质整体柱，但应用于极性和碱性化合物的硅胶基质整体柱的报道还很少(Sebastiaan Eeltink Wim Th.Kok Electrophoresis 2006，27，84-96)。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型反相电色谱硅胶基质整体柱即：烷基胺硅胶毛细管整体柱，以满足在简单的色谱条件下实现包括中性、酸性和碱性化合物在内的大多数有机化合物的分离分析。

本发明的烷基胺硅胶毛细管整体柱，包括毛细管和固定相，固定相结构为下式：

式中：代表硅胶毛细管整体柱，

R代表正链烷基，

R₁代表氢或正链烷基。

优选：

R代表碳原子数从6个至30个的正链烷基，

R₁代表氢或碳原子数从1个至20个的正链烷基。

最优选：

R代表碳原子数从8个至18个的正链烷基，

R₁代表氢或碳原子数从1个至20个的正链烷基。