[发明专利]罗汉果蛋白酶在水解蛋白制取多肽与氨基酸中的应用

说明书

技术领域：

本发明涉及罗汉果蛋白酶的应用，具体地说是罗汉果蛋白酶在水解蛋白制取多肽与氨基酸中的应用。

背景技术：

多肽良好的营养吸收性，极佳的生理功能和加工特性，比没有水解的蛋白具有更好的应用价值。利用酶解法制备多肽是获得多肽与氨基酸的重要方法之一，酶制剂一般选用植物蛋白酶，因为植物蛋白酶比其他来源的酶更绿色、环保、更具有食用的安全性。现在常用的植物蛋白酶是木瓜、菠萝蛋白酶，但酶的活力有限，水解度低，且有的水解产物苦味重。

发明内容：

本发明的目的是公开罗汉果蛋白酶在制取多肽和氨基酸上的应用，它既能解决某些蛋白质水解度和苦味问题，而且工艺简单，操作容易，成本低，便于工业化生产。

本发明是将罗汉果蛋白酶应用于蛋白质的水解制取多肽和氨基酸。使用活性为500-2000U/g罗汉果蛋白酶制剂，据测定罗汉果蛋白酶粗酶制品的酶活力可达150万单位/g，为市面上出售的木瓜蛋白酶的活力的两倍，水解度高。

本发明所述的蛋白为大豆蛋白、酪蛋白、玉米蛋白或鸡蛋蛋白或含有这些蛋白质的物质；所述的罗汉果蛋白酶包括从鲜罗汉果中提取的含有罗汉果蛋白酶活性的鲜罗汉果汁。

应用罗汉果蛋白酶制取蛋白水解物的方法包括如下工艺步骤：

(1)配制一定浓度的蛋白质溶液，在85-100℃处理10-20min后，调节PH值到7.5-9.5；

(2)冷却至45-65℃加入罗汉果蛋白酶，使酶浓度为500-2000U/g蛋白质，进行酶解反应，同时不断加入氢氧化钠溶液，使蛋白质溶液的PH值保持不变，反应30-120min；

(3)反应后，快速加热至90℃，终止酶反应；

(4)过滤得多肽澄清液；

(5)利用超滤、柱层析、冷冻干燥，或喷雾干燥等已知的方法处理，即得多肽和氨基酸产品。

本发明的优点在于：

(1)采用的罗汉果蛋白酶酶资源丰富，罗汉果种植面积大，产量高，能满足工业化生产用酶的需要；

(2)罗汉果蛋白酶本身是一种蛋白，就是一种营养物质，制取出的大豆多肽更绿色、更环保，使用更安全；

(3)罗汉果蛋白酶具有强烈的水解活性，粗酶活力可达到150万单位/g，在相同条件下，与木瓜蛋白酶相比较，采用罗汉果蛋白酶水解方式生产大豆多肽更具有水解度高、水解液澄清透明，低苦味、酸性条件下不沉淀的特点；

(4)利用罗汉果蛋白酶水解大豆蛋白的条件温和，环境友好，不需要特别的试剂，强酸、强碱使用少，催化水解产品作为食品，比其它类型酶的催化产品更具有安全性，且工艺简单，操作容易。

本发明的推广应用将改变蛋白酶水解工业中所用植物蛋白酶资源长期主要依赖木瓜、菠萝等少数植物资源的状况。

具体实施方式：

为进一步说明本发明的技术方案，下面列举几种非限定性实施例。

实施例1：

(1)用大豆分离蛋白或含大豆蛋白的大豆豆粕配制浓度为3％的大豆蛋白质溶液，在85℃处理15min后，调节PH值到8.0；

(2)冷却至50℃加入罗汉果蛋白酶或含有罗汉果蛋白酶的鲜罗汉果汁，使酶浓度为1500U/g(蛋白质)，保持在50℃进行酶解反应，同时不断加入0.1mo1/氢氧化钠溶液，使大豆蛋白质溶液的PH值保持不变，反应60min；

(3)反应后，快速加热至90℃，终止酶反应；

(4)过滤得大豆多肽澄清液；

(5)将上述滤液再经超滤、柱层析、冷冻干燥等已知方法处理，即得到大豆多肽和氨基酸产品。

实施例2：

(1)用玉米蛋白配制浓度为3％的玉米蛋白质浓液，在100℃处理10min后，调节PH值到7.5-9.5；

(2)加入罗汉果蛋白酶，使酶浓度为500U/g蛋白质保持45-65℃进行酶解反应，同时不断加入氢氧化纳浓液，使蛋白质浓液的PH值保持不变，反应120min；

其余同实施例1。

实施例3：

用酪蛋白或鸡蛋蛋白配制浓度为3％的蛋白质浓度，加入的罗汉果蛋白酶的酶浓度为1000U/g，其余同实施例1或实施例2。