[发明专利]一种采用液相色谱法测定溴甲纳曲酮及其杂质的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及用液相色谱法(HPLC)分离测定溴甲纳曲酮及其制 剂的杂质和含量的方法。

背景技术

溴甲纳曲酮(Methylnaltrexone Bromide)是一种外周阿片受体拮抗剂，其分子式为 C₂₁H₂₆O₄NBr，其结构式见下(I)。

溴甲纳曲酮的化学名为：溴化17-(环丙甲基)-4，5α-环氧-3，14-二羟-17-甲基-6-氧代-吗啡喃。 在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体和未知杂质可能会由于去除不完全而影响药 物的纯度和质量，这几个已知中间体和未知杂质以及产生的降解产物即药物质量控制中通常 所说的有关物质(即杂质)。对于溴化(R)-N-甲基纳曲酮的合成主要控制的已知杂质有四个， 分别是起始原料纳曲酮盐酸盐，其结构式见下式(II)，中间体1{17-(环丙甲基)-4，5α-环氧-3，14- 二羟-6-(1，3-二氧戊环-2-基)吗啡喃，其结构式见下式(III)}，中间体2{3-[(叔丁基二甲基硅 烷基)氧基]-17-(环丙甲基)-4，5α-环氧-14-羟基-6-(1，3-二氧戊环-2-基)吗啡喃，其结构式见下式 (IV)}和中间体3{碘化3-[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]-17-(环丙甲基)-4，5α-环氧-14-羟基 -6-(1，3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吗啡喃，其结构式见下式(V)}。

上述测定方法的难度在于溴甲纳曲酮与起始原料只是N原子上多了一个甲基，二者的保 留行为几乎一致，给分离带来难度，而且与中间体2和中间体3比较，极性相差很大，在满 足其与起始原料分离的前提下，同时检测中间体2和中间体3，再加上中间体2和中间体3在 一般色谱条件系统下，峰形很差，柱效很低，增大了检测难度。

对于合成溴甲纳曲酮中引入的杂质及其降解产物，不论是在原料药还是在制剂中都需要 进行质量控制。因此，实现溴甲纳曲酮及其制剂中杂质的分离测定对溴甲纳曲酮原料药以及 制剂的质量控制中具有重要的意义。

根据文献(Joachim Osinski，Anbao Wang等，Journal of Chromatography B Volume 780， Issue 2，25November 2002，Page 251-259)报道，用Phenomenex Prodigy ODS-2(5um，150 ×3.2mm)色谱柱为分离柱，以0.05mol/L醋酸钾溶液-甲醇(89∶11)(pH＝4.5)为流动相， 流速为0.5ml/min，测定血样中的甲基纳曲酮，我们参照试验，发现此条件下，甲基纳曲酮峰 形不好，色谱峰前倾严重；根据专利(PCT/US2006/020233)报道，方法一：用Luna C18(2) (5um，150×4.6mm)色谱柱为分离柱，以0.1％三氟乙酸溶液为流动相A，以0.1％三氟乙 酸甲醇溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为1ml/min，波长为230nm；方法二：用Phenomenex Inertsil ODS-3(5um，150×4.6mm)色谱柱为分离柱，柱温为50℃，以水-甲醇-三氟乙酸(95∶ 5∶0.1％；V/V/V)为流动相A，以水-甲醇-三氟乙酸(35∶65∶0.1％；V/V/V)为流动相B， 梯度洗脱，流速为1.5ml/min，检测波长为280nm；测定(R)-N-甲基纳曲酮和(S)-N-甲基纳 曲酮；我们参照试验，发现，此两种条件下中间体1峰形很差，柱效很低，用于检测可能引 入溴甲纳曲酮的杂质中间体1时，检测限达不到要求，即不能有效控制溴甲纳曲酮的质量， 故没有采用。

为了准确地控制溴甲纳曲酮的质量，有必要寻找一种能简单、快速、准确地分离检测出 溴甲纳曲酮的有关物质的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用液相色谱法(HPLC)分离测定溴甲纳曲酮或其制剂中甲纳 曲酮及其杂质的方法，从而实现对溴甲纳曲酮及其制剂质量的有效控制。

这里所说的杂质是指从合成过程中引入的杂质或产品或其制剂降解产生的杂质，包括起 始原料。所述的测定方法包括溴甲纳曲酮及其制剂的定性分析和定量分析(含量的测定)。

本发明所说的一种采用液相色谱法(HPLC)测定溴甲纳曲酮及其制剂中杂质的方法，其 特征在于：

a采用烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱为分离柱；