[发明专利]蜕皮甾酮作为诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的诱导剂的新应用无效
申请号: | 200810069728.4 | 申请日: | 2008-05-23 |
公开(公告)号: | CN101280291A | 公开(公告)日: | 2008-10-08 |
发明(设计)人: | 储卫华;冯华;陈志;詹梦熊;朱刚;林江凯 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400038重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蜕皮 作为 诱导 哺乳动物 神经 干细胞 神经元 分化 诱导剂 应用 | ||
1、蜕皮甾酮作为诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的诱导剂的新应用。
2、诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基,其特征在于:所述细胞培养基中含有诱导剂蜕皮甾酮。
3、根据权利要求2所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基,其特征在于所述细胞培养基中含有浓度为100-400mg/L的诱导剂蜕皮甾酮。
4、根据权利要求3所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基,其特征在于所述细胞培养基中含有浓度为200mg/L的诱导剂蜕皮甾酮。
5、根据权利要求2、3、4之任一权利要求所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基,其特征在于所述细胞培养基中还含有胎牛血清。
6、根据权利要求5所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基,其特征在于所述细胞培养基中还含有体积百分浓度为5-20%的胎牛血清。
7、根据权利要求6所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基,其特征在于所述细胞培养基中还含有体积百分浓度为10%的胎牛血清。
8、权利要求2所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基的制备方法,包括以下步骤:
a.DMEM/F12基础培养液的制备:取制备DMEM/F12基础培养液1L用量的DMEM/F12(1∶1)干粉1袋、谷氨酰胺2.5g,用浓度为0.1mo l/L、pH值为7.35的磷酸盐缓冲液即PBS溶解并稀释至1L,调节pH值为7.5,用0.2μm微孔滤膜过滤除菌,即得;
b.细胞培养基的制备:按照制备100ml细胞培养基计,取诱导剂蜕皮甾酮10-40mg,加入步骤a制得的DMEM/F12基础培养液70ml使溶解,用0.2μm微孔滤膜过滤除菌后,加入胎牛血清5-20ml、青霉素与链霉素的混合液即由浓度为4万U/ml的青霉素溶液、浓度为4万U/ml的链霉素溶液按1∶1混合而成的溶液1ml,最后用DMEM/F12基础培养液定容至100ml,即得。
9、根据权利要求8所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基的制备方法,其特征在于步骤b中诱导剂蜕皮甾酮的用量为20mg。
10、根据权利要求9所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基的制备方法,其特征在于步骤b中诱导剂蜕皮甾酮的用量为20mg,胎牛血清的加入量为10ml。
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