[发明专利]三角帆蚌多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及医药及保健食品及应用，具体为一种三角帆蚌多糖的制备方法及应用，特别是三角帆蚌多糖的酶法提取制备工艺。

背景技术

三角帆蚌(hyriopsis cumingii)俗称河蚌、珍珠蚌、三角蚌，属淡水双壳类软体动物，辨鳃纲、珍珠科、帆蚌属，广泛分布于我国浙江、湖南、湖北、安徽、江苏、江西等省。我国淡水珍珠的规模化人工育珠已有30多年历史，河蚌珍珠养殖取珠后，蚌肉作为下脚料，除少量鲜食外，绝大部分经简单加工处理后，干燥粉碎作为饲料，资源浪费严重，经济利用价值极低，若处理不及时，还会对环境造成污染。科学分析表明，三角帆蚌肉含有丰富的蛋白质、脂肪、糖类及矿物质，其中蛋白质(干基)含量达40％左右，含有人体必需的八种氨基酸，吸收利用率高，糖类为多糖化合物，含量为30％左右，具有抗疲劳、抗癌等多种生物活性，多糖可用作药用资源及保健食品。曾有报告从三角帆蚌中获得粗多糖组分具有增强小鼠免疫功能的作用，利用粗多糖提取珠蚌单体多糖ZBP-I及在制备肿瘤药中的应用(专利号CN1544478A)，珠蚌均质多糖ZBP-I和ZBP-II及其在制备保肝保健品和保肝药物中的应用(专利号CN1935847A)，采用5％NaOH的浓度、4℃提取三角帆蚌多糖的工艺(中成药，2006，28(5)：746-748)但采用酶法提取制备三角帆蚌多糖的工艺还未见报道。

由于蛋白质易溶于稀碱溶液，采用碱提取粗多糖会使产品蛋白质含量增加，而采用酶法水解除蛋白工艺，与有机溶剂除蛋白工艺相比，反应条件温和，安全且可保持多糖产品的生物活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种较稳定的有较高得率和纯度的三角帆蚌多糖的提取制备工艺。

本发明为一种三角帆蚌混合多糖的提取制备工艺，其提取方法以三角帆蚌肉为原料，热水提取，乙醇沉淀，采用生物酶解工艺去除蛋白，再用乙醇二次沉淀，经真空干燥制成成品。本发明工艺采用生物技术的方法去除蛋白，制成的三角帆蚌多糖精制品，多糖含量高，溶解度好，脂肪含量低，食用安全，具有增强免疫力功能。

本发明的工艺流程为：

三角帆蚌肉搅碎；热水抽提；过滤浓缩；醇沉；沉淀加水复溶；生物酶解除蛋白；浓缩醇沉；真空干燥；成品。

本发明的方法分述为以下步骤：

(1)将三角帆蚌肉用机械搅碎后热水抽提，热水抽提的原料与水的体积比为1∶4～6，煮开后温度控制在90～100℃，抽提时间为10～20min；

(2)将抽提所得物料采用60～100目细布过滤，收集滤液，浓缩滤液至原滤液体积的12.5～20％，再加入90～95％的乙醇进行沉淀，加入量以测定酒精度为60°～85°为止，放置8～10h，离心取沉淀；

(3)在沉淀中加入70～100℃热水复溶，调节pH至7～10，按复溶物料中的蛋白重量计加入0.3～0.6％的复配蛋白酶，在30～60℃的水浴中酶解4～8h，复配蛋白酶的组成为：碱性蛋白酶(Alcalase)和复合蛋白酶(Protamex)等量混合；

(4)酶解后的物料在80～90℃下灭酶15～20min，冷却，加90～95％的乙醇进行二次沉淀，加入量以测定酒精度为60°～85°为止，放置8～10h，离心，沉淀置40～50℃真空干燥，粉碎过60目，即得三角帆蚌多糖制品。

本发明制备三角帆蚌精制多糖的工艺稳定，提取率高，可用作工业化生产，采用斐林试剂法测定三角帆蚌精制多糖总糖含量≥85.0％(以无水葡萄糖计)，凯氏定氮测定蛋白质含量≤4％。三角帆蚌多糖可作为保健食品，动物试验表明具有增强免疫力功能。

具体实施方式：

实施例1三角帆蚌多糖的提取制备工艺