[发明专利]康普瑞汀A－4磷酸酯二钠盐的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及康普瑞汀Combretastatin A-4磷酸酯二钠盐的制备方法。

背景技术

人类以及哺乳动物的一个主要死亡原因是肿瘤疾病。肿瘤的一个显著特征就是非正常增殖。不论正常细胞或者肿瘤细胞，其形成、代谢机分化增殖都离不开微血管，而研究显示肿瘤细胞中血管内皮细胞增殖速度远大于正常细胞，因此血管抑制因子能较特异地抑制肿瘤血管。目前，肿瘤血管抑制剂也是抗肿瘤药物研究的一个热点领域。

康普瑞汀A-4(CA4)最早来源于非洲柳树(Combretum caffrum，Cmbretaceae)提取物(Pettit，G.R.，et al.；Experientia，1989，45，209)。该化合物能明显抑制微管蛋白的聚合，从而抑制微血管。作用于肿瘤细胞可以抑制肿瘤细胞微循环，达到抑制肿瘤生长的目的。但康普瑞汀A-4水溶性极差，不能直接作为药物使用。后发现将康普瑞汀A-4经磷酸化后制成磷酸酯二钠盐，其水溶性较好，抗肿瘤活性大为提高。

康普瑞汀A-4磷酸酯二钠盐(CA4P)，化学名称为：3，4，5，4’-四甲氧基-顺式-二苯乙烯-3’-O-磷酸二钠，结构式如下：

目前，由康普瑞汀A-4(CA4)制备康普瑞汀A-4磷酸酯二钠盐(CA4P)文献报道有以下几种方法：

1.用亚磷酸二苄酯与CA4反应，随后在三甲基氯硅烷和碘化钠存在下脱去苄基。该方法要使用毒性高且危害环境的四氯化碳作为溶剂，同时脱去苄基时要使用价格较贵的硅烷试剂和碘化钠，不利于工业化大生产(GB2403949)。

2.用二-(2，2，2-三氯乙基)磷酰基化合物与CA4反应，再用锌/醋酸还原。该方法中使用的二-(2，2，2-三氯乙基)磷酰基化合物价格昂贵，且反应条件苛刻，不宜工业化大生产。

3.用氧氯化磷或者氧溴化磷与CA4反应，再碱水解得到CA4P。该方法虽然操作简单，但氧氯化磷或者氧溴化磷活性高，因此反应副产物较多，成品收率较低且质量难以控制。

4.申请号：200510057001.0，发明名称：康布瑞汀化合物的制备方法。公开的制备方法为：先制备磷酰二卤，再与CA4反应得到磷酸二酯，再经水解、成盐得到CA4P。该方法所用磷酰化试剂需额外制备，且制备时需要高真空蒸馏，操作繁琐不便，磷酰化反应时间较长，反应过程中温度要变化，且由于磷酰二卤有两个活性位置，导致磷酰化产物纯度不好，需进一步精制才能用于下步反应，导致整个工艺成本较高。

5、PCT/US01/22403，公开了康布瑞汀化合物的制备方法。将CA4溶解于乙腈中，通氩气，加入DMAP，二-(2，2，2-三氯乙基)氯代磷酸酯常温下反应，20min后加入三乙胺，常温反应，30分钟TLC确认反应完全。加入铜/锌混合物，加热到40℃，30分钟后，分批加入2，4-戊二酮，1.5小时后降温至室温。反应混合物过滤，乙腈洗两次，滤液中加入水，在冰浴上冷却，析出固体，加入Dowex离子交换树脂，撤去冰浴，混合物变为橙色均相，过滤除去树脂，滤液蒸干除去绝大部分乙腈，残余物溶解于乙醇中，滴加50％氢氧化钠溶液至pH12～14，搅拌30分钟，过滤，固体用50ml乙醇洗涤。将粗品CA4P，溶解于甲醇水混合溶液中，过滤，加热到35～40℃维持1小时，降温至30℃，加入丙酮，冷却至室温，搅拌2小时，再加入丙酮，搅拌12～16小时，次日过滤，滤饼用丙酮/水洗涤两次，再用丙酮洗，产品于40℃真空干燥。该方法纯化过程繁锁。

上述专利采用的是：CA4同二-(2，2，2-三氯乙基)氯代磷酸酯，其化学性质活泼，造成反应产物不易控制，得率很低，且将CA4P粗品在PH值为12-14，化学性质极不稳定，也会造成产率降低；同时也造成后续的纯化方法繁杂，采用离子交换树脂进行分离纯化，使成本大大增加，更不利于工业化大生产。上述专利申请除了采用(2，2，2-三氯乙基)外，还提到采用四溴化碳磷酸二苯基进行反应，其纯化方式同样繁琐，不便于工业化大生产操作。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种新的CA4P的制备方法。

本发明提供了康普瑞汀Combretastatin A-4磷酸酯二钠盐的制备方法，它是按下述合成路线进行合成：

其中：

X为氯或溴；R₁与R₂为叔丁基、三苯基甲基、2-氰基乙基、苄基、苯基、4-硝基苯基、2-硝基苯基、4-硝基苄基、2-硝基苄基，R₁与R₂为相同或不同取代基。