[发明专利]六味地黄丸双波长覆盖融合指纹图谱的质量控制方法

权利要求书

1.六味地黄丸双波长覆盖融合指纹图谱的质量控制方法，其特征在于该方法按如下步骤进行：

(1)供试品溶液的制备：取本品六味地黄丸切碎，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声提取60～120分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备：精密称取马钱苷对照品、丹皮酚对照品适量，加甲醇分别制成每1mL含马钱苷对照品14μg、丹皮酚对照品18μg的溶液，即得；

(3)测定方法：照高效液相色谱条件(中国药典2005版一部附录VID)测定，色谱条件和系统适用性试验，色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相梯度见表1；流速1.0mL/min；检测波长236nm、274nm；进样量10μL，理论塔板数计算，应不低于3000；

表1流动相梯度洗脱表

  时间(min)  流速(mL/min)    水％  乙腈％    0    8    21    40    50    1.0    1.0    1.0    1.0    1.0    99    88    88    10    10    1    12    12    90    90

(4)双波长覆盖融合：在236nm波长下测得供试品以马钱苷为对照的色谱图的保留时间与峰面积；与在274nm波长下测得供试品以丹皮酚为对照的色谱图的保留时间与峰面积，使用Matlab 7.1进行编程；覆盖后的指纹图谱特征参数为：有七个共有峰，各特征峰以7号峰为参照峰，相对保留时间分别为：0.26，0.36，0.50，0.68，0.82，0.91，1，见图8；

(5)对上述确定的测定方法进行有效性评价，其中包括专属性、准确度、精密度、重复性、稳定性、测定范围以及耐用性。

2.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，该方法供试品溶液的制备：取本品水蜜丸切碎，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声提取，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.如权利要求1所述的质量控制方法，其中的双波长覆盖融合，指的是：将236nm波长下测得六味地黄丸的HPLC色谱图及在274nm波长下测得六味地黄丸的HPLC色谱图，使用Matlab 7.1进行编程覆盖融合；计算指纹峰的相对保留时间，其中马钱苷的相对保留时间为0.45-0.55，丹皮酚的保留时间为1。

4.如权利要求书1～3任一项所述的质量控制方法，其中的六味地黄丸质量控制方法可检测提取方法相同或相近含有六味地黄组成的任何一种剂型。

5.如权利要求书4所述的质量控制方法，其中六味地黄丸的剂型包括水蜜丸、大蜜丸、浓缩丸、颗粒或胶囊。