[发明专利]一种基于piggyBac转座子的弓形虫基因转移载体及构建方法

权利要求书

1.一种弓形虫基因转移载体，包含piggyBac转座子表达载体及表 达piggyBac转座酶的辅助质粒；其特征在于：piggyBac转座子表达载体 包含来源于昆虫粉纹夜蛾piggyBac转座子的反向重复序列，弓形虫速殖 子特异蛋白SAG的5′端非编码区和3′端非编码区，或缓殖子特异蛋白BAG 的5′端非编码区和3′端非编码区；辅助质粒包含弓形虫特异蛋白调控元 件和piggyBac转座酶编码基因。

2.权利要求1所述载体的制备方法，包括以下步骤：

1)piggyBac转座子表达载体的构建：运用PCR技术分别克隆弓形虫 速殖子或缓殖子特异性表达蛋白SAG1或BAG1的5′端非编码区和3′端 非编码区；构建弓形虫目的基因表达盒；通过基因克隆技术将上述构建 的目的基因表达盒克隆入piggyBac反向重复序列之间，构建弓形虫 piggyBac转座子表达载体；

2)辅助质粒的构建：将piggyBac转座酶编码基因克隆入弓形虫SAG1 5′端非编码区下游，构建能表达转座酶的辅助质粒。