[发明专利]转基因水稻TT51-1转化事件外源载体整合位点全序列及其应用有效
申请号: | 200810048245.6 | 申请日: | 2008-07-01 |
公开(公告)号: | CN101302520A | 公开(公告)日: | 2008-11-12 |
发明(设计)人: | 卢长明;吴刚;武玉花;肖玲;曹应龙;李均 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12Q1/68 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 黄瑞棠 |
地址: | 430062湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 水稻 tt51 转化 事件 载体 整合 位点全 序列 及其 应用 | ||
1.一种转基因水稻TT51-1转化事件外源载体整合位点全DNA,其特征是:
碱基序列如SEQ ID NO:1所示。
2.按权利要求1所述的转基因水稻TT51-1转化事件外源载体整合位点全DNA的应用,其特征是利用该序列特征设计的转基因水稻外源基因整合事件TT51-1的事件特异性定性PCR检测方法:
合成引物序列如下:TT511G:5’GCGTCCAGAAGGAAAAGGAATA 3’和TT511V:5’AGAGACTGGTGATTTCAGCGGG 3’;提取样品总DNA,分别利用TT511G/TT511V引物组合进行PCR扩增;PCR产物以琼脂糖凝胶电泳分离,EB染色后鉴定是否存在扩增产物,如存在扩增产物则说明样品中含有转基因水稻TT51-1转化事件来源的成分。
3.按权利要求1所述的转基因水稻TT51-1转化事件外源载体整合位点全DNA的应用,其特征是利用该序列特征设计的转基因水稻外源基因整合事件TT51-1的事件特异性定量PCR检测方法:
合成引物序列如下:TT511G:5’GCGTCCAGAAGGAAAAGGAATA 3’和TT511V:5’AGAGACTGGTGATTTCAGCGGG 3’;合成TaqMan探针序列如下:TT511P:5’FAM-ATCTGCCCCAGCACTCGTCCG-BHQ1 3’;提取样品总DNA,分别利用上述引物TT511G/TT511V和探针TT511P组合进行荧光定量PCR扩增;转基因水稻TT51-1基因组DNA被相同浓度非转基因水稻基因组DNA稀释至不同含量,以20ng的混和水稻基因组DNA为模板,进行荧光定量PCR反应并建立标准曲线;以标准曲线为参照测定含有转基因水稻TT51-1转化事件基因组DNA的混和水稻基因组DNA样品中转基因水稻TT51-1转化事件基因组DNA的量。
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