[发明专利]天然芸苔素内酯的生物酶解制备方法

权利要求书

1.天然芸苔素内酯的生物酶解制备方法，其特征在于经过下列步骤：

A、发酵产酶培养基120℃灭菌30min，冷却至28℃接入假单胞菌种子，28～30℃ 搅拌45r/min，通气培养，发酵时间为76h，其中培养基组成为：油脂0.75％， 硝酸钠0.2％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，pH7.5；

B、反应发酵液加入絮凝剂再离心除去菌体，获得粗酶液；

C、粗酶液经中空纤维系统超滤浓缩，同时去掉无机盐及部分小分子物质，得到 2000～2500U/L的浓缩酶液；

D、将浓缩酶液加到分散的蜂蜡乳化液中，调pH7.0～8.5，搅拌，升温到30～40℃， 定向水解不少于3h，水解接近终点时，加入适量的乙醇；

E、酶解液经乙醇萃取，板框压滤机过滤，浓缩罐浓缩后，采用树脂吸附柱分离 纯化，真空浓缩，结晶，得到99％芸苔素内酯产品。

2.根据权利要求1所述的天然芸苔素内酯的生物酶解制备方法，其特征在于：

所述的假单胞菌是保藏号为CGMCC No.1.867的荧光假单胞菌。

3.根据权利要求1所述的天然芸苔素内酯的生物酶解制备方法，其特征在于：

所述的步骤D中蜂蜡乳化液制作工艺为，每100L水中，加入蜂蜡20～30kg，乳 化剂0.6～0.9kg，在70～80℃搅拌50～60r/min，乳化2～3h。