[发明专利]可溶性VEGFR双功能融合受体、其制备方法及用途

权利要求书

1.一种可溶性双功能VEGFR融合受体，为包含VEGFR1和VEGFR3在内的融合蛋 白，既能与VEGF和VEGF-B结合，还能与VEGF-C或VEGF-D相结合，为VEGFRIg， 其轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO：8所示，重链的氨基酸序列为SEQ ID NO：10 所示。

2.权利要求1所述的可溶性双功能VEGFR融合受体VEGFRIg的突变体，为 VEGFRIgM，其轻链的氨基酸序列为SEQ ID NO：14所示，重链的氨基酸序列为SEQ  ID NO：10所示。

3.一种可溶性双功能VEGFR融合受体，为包含VEGFR1和VEGFR3在内的融合蛋 白，既能与VEGF和VEGF-B结合，还能与VEGF-C或VEGF-D相结合，为VEGFRFc， 其特征在于为两条相同的多肽链通过二硫键结合，其中多肽链的氨基酸序列为 SEQ ID NO：12所示。

4.一种分离的核酸分子，编码权利要求1或3所述的可溶性双功能VEGFR融合 受体。

5.一种分离的核酸分子，编码权利要求2所述的可溶性双功能VEGFR融合受体 VEGFRIg的突变体。

6.一种分离的核酸分子，编码权利要求1所述的可溶性双功能VEGFR融合受体 VEGFRIg，其中编码轻链的核苷酸序列为SEQ ID NO：7，编码重链的核苷酸序列 为SEQID NO：9。

7.一种分离的核酸分子，编码权利要求2所述的可溶性双功能VEGFR融合受体 VEGFRIg的突变体VEGFRIgM，其中编码轻链的核苷酸序列为SEQ ID NO：13，编 码重链的核苷酸序列为SEQ ID NO：9。

8.一种分离的核酸分子，编码权利要求3所述的可溶性双功能VEGFR融合受体 VEGFRFc中的多肽链，其核苷酸序列如SEQ ID NO：11所示。

9.一种载体，含有权利要求5、6、7、8任一所述的核酸分子和所述核酸分子的 序列操作性相连的表达调控序列，其中载体可以为pDR1，pcDNA3.1(+)， pcDNA3.1/ZEO(+)，pDHFR之一。

10.权利要求9所述的载体，为pcDNA3.1(+)或pcDNA3.1/ZEO(+)。

11.一种宿主细胞，含有权利要求9所述的载体，为真核细胞。

12.权利要求11所述的宿主细胞，为哺乳动物细胞。

13.权利要求12所述的宿主细胞，为CHO细胞。

14.一种制备权利要求1或3所述的可溶性双功能VEGFR融合受体或权利要求2 所述的突变体的方法，该方法包括：

a)在表达条件下，培养权利要求11-13任一所述的宿主细胞，表达双功能 融合受体，

b)分离或纯化所述的双功能融合受体。

15.一种组合物，含有权利要求1或3所述的可溶性双功能VEGFR融合受体或权 利要求2所述的突变体和药学上可接受的载体。

16.权利要求1或3所述的可溶性双功能VEGFR融合受体或权利要求2所述的突 变体在制备抗肿瘤药物中的用途。

17.权利要求15所述的组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

18.权利要求16、17任一所述的用途，还包括和其它的抗肿瘤药物联合使用。