[发明专利]一种提高植物乳杆菌稳定性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物乳杆菌，特别是一种提高植物乳杆菌稳定性的方法。

背景技术

目前，益生菌在国际上普遍受到科学家、企业家和消费者的关注。益生菌是“21世纪的热门话题”、“保健事业中最有价值的产品”、“真正的多功能食品”、“既是食品又是药品”、“具有潜在市场的新兴工业”等。

根据FAO/WHO《食品益生菌评价指南》规定，食品用乳酸菌有以下三个特点：(1)活的微生物，(2)对人体健康有益，(3)服用一定数量。也就是说，只有服用一定数量活的乳酸菌才对人体有益。因此，乳酸菌的活菌数是产品的重要指标。

而乳酸菌在加工、保存、运输、使用过程中受环境条件如热、酸、氧等的影响而易失活，且随着保存时间的延长，其活菌数量不断减少，活力逐渐减弱，而影响其生理功能。其稳定性差是限制其应用的一个瓶颈问题。许多乳酸菌产品由于其耐热、耐酸及耐氧等性能的限制，均需冷藏贮存及运输，产品保质期短、成本高，从而妨碍了它们的应用。

因此，为保证乳酸菌生理功能的有效发挥，扩大乳酸菌应用，就必须提高其稳定性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高植物乳杆菌稳定性的方法，通过采用微生物代谢工程策略，主要是通过利用渗透和温度两种压力应激处理技术，提高植物乳杆菌稳定性能。这将为乳酸菌提高稳定性提供一个具现实意义的方法，从而以提高产品品质，提供常温益生菌产品加工可行性，延长产品货架寿命。

为解决上述技术问题，本发明是这样实现的：

一种提高植物乳杆菌稳定性的方法，其特征在于：该植物乳杆菌为植物乳杆菌LP-Onlly，在发酵对数期后期添加NaCl或进行高温处理或进行低温处理，以提高植物乳杆菌细胞的稳定性能。

该植物乳杆菌已于2004年12月6日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称：CGMCC(地址：中国北京市海淀区中关村一条13号，中国科学院微生物研究所)保藏，保藏登记号CGMCCNO 1258。其分类命名为：植物乳杆菌，拉丁名：Lactobacillusplantarum，菌株为植物乳杆菌LP-Onlly，其16S rRNA基因GeneBank(NCBI)序列登录号为AY590777。

所述的提高植物乳杆菌稳定性的方法，其特征在于：在发酵对数期后期添加10～30g/L NaCl应激处理30～60min。

所述的提高植物乳杆菌稳定性的方法，其特征在于：在发酵对数期后期以43～47℃应激处理30～60min。

所述的提高植物乳杆菌稳定性的方法，其特征在于：在发酵对数期后期以15～25℃应激处理30～60min。

具体实施方式：

本发明提供了一种提高植物乳杆菌稳定性的方法，主要技术方案是通过渗透和温度两种压力应激，提高植物乳杆菌细胞稳定性。具体情况详叙如下：

1.菌株

植物乳杆菌LP-Onlly(Lactobacillus plantarum LP-Onlly)，为上海交大昂立股份有限公司研究院从健康婴儿粪便中分离、鉴定并保存。

2.培养基

包括斜面培养基、种子培养基及发酵培养基均为MRS培养基。

3.培养方法

a)一级种子培养：从斜面培养基上挑二环菌至种子培养液中，50ml三角瓶装液30ml，37℃培养16～22h。

b)二级种子培养：将一级种子液以万分之一的接种量接入种子培养液中，50ml三角瓶装液30ml，37℃培养16～22h。

c)发酵培养：将二级种子液以万分之一的接种量接入发酵培养液中，50ml三角瓶装液30ml，37℃培养16～22h。

4.分析方法

(1)耐热性能评价方法：将发酵液细胞置于50℃下30min后测定细胞残存率，以残存率为指标评价细胞耐热性能，残存率越高，细胞耐热性越佳。

(2)耐酸性能评价方法：将发酵液细胞置于pH2.5、37℃下60min后测定细胞残存率，以残存率为指标评价细胞耐热性能，残存率越高，细胞耐热性越佳。

(3)活菌计数方法：参见GB/T 4789.35-2003(乳酸菌饮料中的乳酸菌检验)。

实施例1：在植物乳杆菌LP-Onlly发酵对数期后期加入10g/L NaCl应激处理30min。

在发酵对数期后期，添加10g/L NaCl应激处理30min，考察细胞耐热和耐酸性能。