[发明专利]一种双歧杆菌生长促进因子及其制备方法

权利要求书

1、一种双歧杆菌生长促进因子的制备方法，其特征在于：在水中，用中性蛋白酶酶解大豆，即制得双歧杆菌生长促进因子。

2、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的中性蛋白酶的用量为0.01-0.2％；所述的百分比为中性蛋白酶质量占水、大豆和中性蛋白酶总质量的百分比。

3、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的中性蛋白酶的酶活为100-130u/mg。

4、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：在水中进行所述的酶解时还加入胰蛋白酶，将其与中性蛋白酶共同酶解大豆。

5、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的中性蛋白酶的用量为0.005-0.1％；胰蛋白酶的用量为0.005-0.1％；所述的百分比为中性蛋白酶或胰蛋白酶的质量占水、大豆、中性蛋白酶和胰蛋白酶总质量的百分比。

6、如权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于：所述的大豆的用量为7.99-20.00％；所述的水的用量为79.80-92.00％；所述的百分比为大豆或水占水、大豆、和蛋白酶总质量的百分比，所述的蛋白酶为中性蛋白酶，或中性蛋白酶加胰蛋白酶。

7、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的胰蛋白酶的酶活为2000-2500u/mg。

8、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于其包含下述步骤：

(1)向水和大豆混合磨浆制得的豆浆中加入酶进行酶解，之后加热酶解液；

(2)离心取上清液，微孔滤膜抽滤，浓缩，葡聚糖凝胶柱层析，收集紫外光波长为280nm的洗脱液，浓缩至干即可。

9、如权利要求8所述的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中，所述的豆浆的pH为7.5-8.0；所述的酶解的温度为30-60℃，酶解的时间为2-10小时；酶解之后，所述的加热酶解液的温度为60-100℃，加热时间为2-20分钟；

步骤(2)中，所述的离心取上清液的操作为：先以3024g的速度离心10-50分钟，取上清液，之后再以10000-20000g的速度离心10-50分钟；所述的微孔滤膜的孔径为0.45μm；所述的浓缩的操作为浓缩至蒸发前体积的1/6-1/5；所述的葡聚糖凝胶柱为葡聚糖凝胶Sephadex G15；柱层析条件为：浓缩物加入量为1毫升；洗脱液为质量百分比为0.01％-0.1％的乙酸铵，洗脱液用量为柱体积的2.5-3.5倍；洗脱液流速为0.4毫升/分钟；在洗脱7小时15分钟至8小时20分钟的时段进行收集。

10、用权利要求1～9任一项所述的方法制得的双歧杆菌生长促进因子。