[发明专利]一种葛根芩连药物的有效成分的检测方法

权利要求书

1、一种葛根芩连药物的有效成分的检测方法，该方法由以下步骤组成：

(1)配制待检进样液：取葛根芩连药物用溶剂配制成含药物0.2mg～2mg/ml的待检进样液；

配制混合对照品溶液：取葛根素、大豆苷、黄芩苷、汉黄芩苷、巴马汀和小檗碱混合后用溶剂配制成各成分浓度为1～200μg/ml的对照品溶液；然后将待检进样液和混合对照品溶液分别按以下方法进行高效液相色谱检测：

按进样量为1～20μl对以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱进样，控制柱温10～40℃，接着用由A相和B相组成的流动相以0.3～1.5ml/min的流速并按表1的程序进行梯度洗脱，同时采用检测波长为248～256nm、274～285nm和344～350nm的紫外光检测洗脱液，获得被检药物以及对照品的高效液相色谱图谱；

                              表1

(2)所得混合对照品溶液的高效液相图谱中左起第2锋至第7峰依次为葛根素、大豆苷、黄芩苷、汉黄芩苷、巴马汀和小檗碱；将被检药物的高效液相图谱与对照品溶液所得的图谱比较，与混合对照品溶液图谱中相应成分的保留时间相同的峰即是与该成分相同物质的特征峰，并根据峰面积按外标法计算含量；

上述步骤中，

配制待检进样液或对照品溶液所用的溶剂是10～95％乙醇或10～100％甲醇，或者是与流动相相同的溶剂；

所述流动相的A相是由三乙胺和0.01mol/L～0.1mol/L醋酸胺溶液按以下方法制成：在0.01mol/L～0.1mol/L醋酸胺溶液加入溶液体积0.1％～1％的三乙胺，用冰醋酸调酸度至pH2.5～6；

所述流动相的B相是乙腈。

2、根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于用如表2所示程序进行梯度洗脱。

                             表2

3、根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于用如表3所示的程序梯度洗脱。

                             表3

4、如权利要求1～3所述的检测方法，其特征在于所述的紫外光多波长检测的检测波长为250nm、280nm和346nm。

5、根据权利要求1～3所述的检测方法，其特征在于当葛根芩连药物为固态时，所述的待检进样液的采用下述方法配制：精密称取适量固体药物，研细，然后用溶剂溶解并采用常用的中药提取纯化方法与处理，最后用溶剂定容至浓度为含固体药物0.2mg/ml～5mg/ml，过滤，即可。

6、根据权利要求1～3所述的检测方法，其特征在于当葛根芩连药物为液态时，所述的待检进样液的采用下述方法配制：精密量取适量液体制剂，然后用溶剂溶解并采用常用的中药提取纯化方法处理，最后用溶剂定容至浓度为含蒸干药物0.2mg/ml～5mg/ml，过滤，即可。

7、根据权利要求1～3所述的检测方法，其特征在于所述的A相的制备方法是：在0.02mol/L醋酸胺溶液中加入溶液体积0.4％的三乙胺，用冰醋酸调pH4～4.8。

8、根据权利要求1～3所述的检测方法，其特征在于所述的流速是0.7ml/min。

9、根据权利要求1～3所述的检测方法，其特征在于所述的葛根芩连药物是由以下重量配比的原料药制备得到的提取物或成品制剂：葛根15～24份、甘草6份、黄芩9份、黄连9份。