[发明专利]猪圆环病毒2型灭活疫苗无效
申请号: | 200810024423.1 | 申请日: | 2008-03-21 |
公开(公告)号: | CN101240264A | 公开(公告)日: | 2008-08-13 |
发明(设计)人: | 姜平;王先炜;李玉峰 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12N7/02;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/93 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 张素卿 |
地址: | 210095江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 圆环 病毒 型灭活 疫苗 | ||
1.猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗毒株SH,其特征在于,猪圆环病毒2型毒株SH属于圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属(Circovirus),中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏,保藏日期:2008年3月4日,保藏号为CGMCC No.2389。
2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型疫苗毒株(SH),是通过以下方法构建而成的:
(1)病毒的分离和培养2002年从上海地区发生严重的断奶仔猪多系统衰竭综合症的猪场采集病料,病料经匀浆、反复冻融3次后,高速离心后经0.22um滤膜过滤后接种于长满单层的PK-15细胞,对接种病料的PK-15细胞进行连续细胞传代进行病毒分离;
(2)猪圆环病毒2型阳性分离株的鉴定将PK-15细胞连续传代6代后,取其中的部分细胞经冻融后提取PCV-2病毒的DNA,用针对PCV-2病毒Cap蛋白基因的特异性PCR引物对目的基因扩增,扩增产物克隆入pMD-18T载体进行测序;
(3)PCV2-SH分离株的纯化鉴定好PCV2分离株经有限稀释法进行病毒纯化,共进行3次病毒纯化,获得了纯化的PCV2病毒的上海分离株SH。
3.用权利要求1或2所述的猪圆环病毒2型疫苗毒株(SH)制备的疫苗。
4.用权利要求1或2所述的猪圆环病毒2型疫苗毒株(SH)制备疫苗的方法,包括:
将PCV2-SH株在PK-15细胞中大量增殖,经甲醛灭活加入白油佐剂进行乳化,制备常规的白油佐剂疫苗。
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