[发明专利]一种含CMP激酶和CDP激酶的啤酒酵母菌的筛选及应用有效

专利信息
申请号: 200810023903.6 申请日: 2008-04-18
公开(公告)号: CN101265453A 公开(公告)日: 2008-09-17
发明(设计)人: 周长林;罗众球;闫蓬勃;邱蔚然 申请(专利权)人: 中国药科大学;南通秋之友生物科技有限公司
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12N11/04;C12Q1/04;C12P19/30;C12R1/865
代理公司: 南京苏科专利代理有限责任公司 代理人: 姚姣阳
地址: 210009江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 cmp 激酶 cdp 啤酒 酵母菌 筛选 应用
【权利要求书】:

1.一种含有CMP激酶和CDP激酶的啤酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)菌株,其在中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏号是:CGMCCNO.2448。

2.根据权利要求1所述菌株在生产胞苷三磷酸中的应用,其特征在于:首先利用包埋法以卡拉胶-魔芋多糖复配胶为载体将所述菌种制成固定化细胞后加入合成胞苷三磷酸的反应体系中,再利用离子交换分离纯化的方法分离纯化反应液,结晶得到胞苷三磷酸。

3.根据权利要求2所述菌株在生产胞苷三磷酸中的应用,其特征在于:所述包埋法以卡拉胶-魔芋多糖复配胶为载体将所述菌种制成固定化细胞的具体步骤是:

(1)将卡拉胶钠盐和魔芋粉溶于去离子水中,蒸汽加热到121℃后保温40~70分钟,倒入反应釜中自然冷却到40℃,胶液保温,其中k-卡拉胶钠盐与魔芋粉的重量比为2∶1;

(2)另将生理盐水加入洗涤好的啤酒酵母湿菌体中搅拌均匀制成酵母悬液,35℃保温,其中生理盐水和啤酒酵母湿菌体的重量比为1∶4;

(3)将步骤(2)中的酵母悬液倒入步骤(1)的胶液中,于40℃下搅拌20~40分钟,使之混匀得到混合物;

(4)在带搅拌的反应釜中加入溶剂预热至40℃,将步骤(3)得到的混合物倒入带搅拌的反应釜,搅拌20~40分钟待混合物形成颗粒,过滤,其中搅拌速度为50-150rpm;

(5)将步骤(4)中过滤后的颗粒在氯化钾溶液中浸泡30~90分钟,过滤,再用戊二醛浸泡30~90分钟,用筛网沥尽颗粒表面水分后,装袋至冰箱冷藏。

4.根据权利要求3所述菌株在生产胞苷三磷酸中的应用,其特征在于:所述步骤(4)中采用的溶剂为豆油,所述固定化细胞为球状。

5.根据权利要求2所述菌株在生产胞苷三磷酸中的应用,其特征在于:所述离子交换分离纯化的方法分离纯化反应液的步骤中采用HZ-1离子交换树脂进行离子交换色谱,并用0.4~1.0mol/L氯化钠溶液每小时以0.2-0.5柱体积进行梯度洗脱,得到胞苷三磷酸洗脱液。

6.根据权利要求5所述菌株在生产胞苷三磷酸中的应用,其特征在于:所述结晶的步骤中将洗脱液在50~70℃水浴下减压浓缩,加入3倍体积的95%乙醇,于冰箱静置过夜后抽滤,将滤饼干燥得到胞苷三磷酸。

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