[发明专利]鸡腿菇液体转化桑叶的发酵液制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物发酵及医药领域，具体的说本发明涉及鸡腿菇液体转化桑叶的发酵液制备方法，以及由该方法获得的含有该发酵液的药物或保健品。所述的发酵液具有多种药物功能，可用于制备预防和治疗糖尿病及糖尿病并发症的药物或保健饮品。

背景技术

糖尿病是目前中老年人的常见病和多发病，由糖尿病引起的并发症严重危及人们的生命健康。现有西药类降糖药物虽作用效果好，靶点清楚，长期服用易引起副作用。而中药毒副作用小，且来源广泛，成本较低，是用于治疗糖尿病的一个主要药物来源。

桑叶是桑科植物桑Morus alba L的干燥叶。桑叶作为中药，旱已在民间广泛应用。自古以来中医就用桑叶来治疗消渴证(相当于现代医学的糖尿病)。《木草纲日》记载：桑叶“汁煎代茗，能止消渴”、“灸热煎饮，代茶止渴”。近代医家也常将桑叶配伍于中药复方中应用于临床，收效甚好。现代药理研究证明桑叶具有抑制血糖上升之功效，可预防和治疗糖尿病。近年来，各国研究人员对桑叶的组成、功能和作用机理进行了系统地研究，结果发现桑叶中含有丰富的氨基酸、纤维素、维生素、矿物质以及多种生理活性物质，具有降血糖、降血压、降血脂、延缓哀老等多种保健功效。1996年，陈福君等用桑叶总多糖(TPM)对四氧嘧啶糖尿病小鼠进行腹腔汁射给药，结果表明TPM有显著的降血糖作用。但TPM的结构尚不清楚，有待进一步研究。2002年，陈金显等曾经对一种以桑叶为主要原料的保健品功效成分进行研究，结果表明桑叶多糖和生物碱均能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的空腹血糖，并有明显预防小鼠血糖升高的作用。2005年，吴志平等对桑树不同药用部位的降血糖效果进行了比较，发现桑叶、桑白皮、桑枝、桑皮这四中中药材都有明显的降血糖作用。尽管桑叶具有这些功效，但是桑叶仍具有中药的共性：见效慢，质量不稳定有时还具有副作用。如何克服桑叶缺点提高桑叶疗效呢？无疑生物转化是一个有效的手段。用于生物转化的菌种有多种，但药食用真菌转化桑叶具有安全无毒等特点，更受到科研工作者的青睐。

鸡腿菇，(Coprinus comatus)是药用真菌的一种，学名毛头鬼伞，隶属于真菌门(Eumycota)，担子菌亚门(Basidiomycotina)，层菌纲(Hymenomycetes)，伞菌目(Agaricales)，鬼伞科(Coprinaceae)，鬼伞属(Coprinus)。鸡腿菇肉质细嫩、鲜美可口、营养丰富。目前，该品种已被定为符合联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)要求的集“天然、营养、保健”三种功能为一体的16种珍稀食用菌之一。近年来国内外对鸡腿菇的研究主要集中于它的驯化栽培、营养成分分析、液体培养以及菌丝体内多糖及药效等方面。1984年，英国阿斯顿大学Bailey C.J报道鸡腿菇含有降血糖的有效成分。1993年，黄年来用鸡腿菇水提物浓缩液饲养小鼠，1.5h有明显降低血糖浓度的效果。2000年，王玉萍等利用深层发酵方法获得获得富铬鸡腿菇发酵液，进行急性毒性试验，并对四氧嘧啶诱发的小鼠糖尿病模型做了降血糖试验。2002年，韩春超等研究了鸡腿菇发酵液与钒酸钠协同抑制小鼠血糖升高的作用。目前已经公布的鸡腿菇的8项专利主要是鸡腿菇的栽培和鸡腿菇多糖的提取以及鸡腿菇菌丝的棘状小球结构及其应用。

本发明与上述文献或相关专利区别在于本发明侧重于鸡腿菇转化桑叶，通过鸡腿菇在培养过程中与桑叶相互作用提高降血糖作用，鸡腿菇转化桑叶产生的培养液中多酚类化合物的提取方法以及这种培养液和多酚类化合物在预防和治疗糖尿病方面的应用。

发明内容

本发明的一个目的是提供了一种以鸡腿菇为菌种通过液体深层培养转化桑叶的方法，由该培养方法制备的鸡腿菇转化桑叶的发酵液，该发酵液具有调节血糖，预防和治疗糖尿病及其并发症的功效。

本发明所使用的鸡腿菇菌种可选用任意一种鸡腿菇菌种，例如河南、河北、江苏或山西的野生鸡腿菇经常规组织分离得到的菌种。本发明含有鸡腿菇转化桑叶的生产工艺包括以鸡腿菇为出发菌株，以桑叶为原料，进行液体摇瓶培养、一级种子培养和发酵培养，得到鸡腿菇转化桑叶的发酵液。

更具体地，本发明涉及鸡腿菇以桑叶为原料进行深层培养的生产工艺包括以下步骤：

(1)在本发明所述的发酵工艺中，在进行发酵培养之前，首先将鸡腿菇的斜面菌种接入新配制的斜面培养基中进行活化培养，培养温度20～35℃，培养时间72～240小时；其中所述的斜面培养基是现有技术中常用的斜面培养基，例如常用的是PDA培养基，此类培养基的组成和所用可参见诸葛健，王正祥，工业微生物实验技术手册，1994：P 367；