[发明专利]一种液体发酵培养富硒、锌元素的金针菇菌丝体的方法

说明书

技术领域

一种液体发酵培养富硒、锌元素的金针菇菌丝体的方法，属于生物工程技术领域。涉及发酵法培养金针菇菌丝体，是将金针菇孢子接种至新鲜的固体斜面上进行培养，待斜面长好后接种至含较低浓度无机硒与无机锌的液体培养基中进行种子的培养，即对菌种加以驯化；再接入添加了适量硒元素、锌元素的发酵培养基中进行深层液体发酵培养，利用金针菇的富集与转化功能，使菌丝体中积累高浓度的有机硒和有机锌。发酵结束后，通过对菌体的收集、烘干，得到同时富含有机硒元素、有机锌元素的金针菇菌丝体粉。

背景技术

金针菇(Flammulina velutipes)是世界著名的食用菌之一，属担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，口蘑科，冬菇属(Flammulina)或金钱菌属(Collybia)。金针菇肉质细嫩、软滑，味道宜人。其蛋白质含量高。据分析表明，每百克鲜金针菇中含维生素B₂53.2毫克，维生素C 10.9毫克。每百克干金针菇中含蛋白质13克，碳水化合物52克，矿物质7.56克，还含有胡萝卜素、多种氨基酸和核酸。金针菇含有人体必需氨基酸成分较全，尤其是赖氨酸和精氨酸的含量特别高，有益于儿童脑细胞的发育，因此国外称其为″增智菇″。金针菇中还含有一种叫朴菇素的物质，可增强机体对癌细胞的抗御能力。金针菇含有的金针菇多糖具有降低胆固醇、抗菌活性、免疫活性和抗肿瘤作用。它可以调节机体代谢水平，提高肝脏解毒能力，促进核酸和蛋白质生物合成，有助于损伤细胞的修复和更新，从而延缓细胞衰老，有益于延年益寿。研究表明，常以子实体用药的真菌，在它们的菌丝体中亦含有与子实体相同的药效成分与相似有效成分含量。这就给液体发酵法生产金针菇菌丝体提供了理论依据。

硒是一种准金属元素，是生物体必需的微量元素之一，它在人体内具有抗氧化、防衰老作用，能保护细胞膜的结构和功能，增强机体免疫力，对于心血管功能、生育、视力等有重要影响，而真正发挥生物活性作用的是有机硒。世界上有40多个国家和地区缺硒，我国72％地区为缺硒、低硒地区，膳食中硒摄入量的不足严重影响着人们的身体健康。天然食品的硒含量中，亚硒酸钠等的无机硒因毒性较高只能用于医药不能用于食品，况且无机硒的利用率也很低。

锌也是对人体机能有重要作用的金属元素之一。锌是很多金属酶的组成成份或酶的激活剂。与锌有关的酶大约有70-100种。锌无法在人体内合成，只能从体外获得。锌缺乏在中国人群中普遍存在，婴儿、儿童、孕妇和育龄妇女缺锌尤其严重。补充有机态锌可以消除无机锌对人体的副作用和对胃肠的刺激，从而使锌能被人体更高效、更安全地吸收利用。

金针菇已证实具有一定富锌能力和富硒能力菌丝体中硒和锌有机化程度高。硒存在于含硫元素的化合物中，如蛋白质、氨基酸、多糖、核糖核酸等生物大分子物质中。而金针菇内的有机锌50％以上与蛋白结合，34％与糖和脂类结合，特别容易被人体吸收和利用。

发明内容

本发明的目的是提供一种深层液体发酵法培养同时富含有机硒元素、有机锌元素的金针菇菌丝体粉的方法。本发明采用先进的生物技术，并且利用高等真菌具有转化性的富集微量元素能力的特点，进行纯种液体深层发酵培养金针菇菌丝体，创造性使一种食用菌产品成为可以同时补充两种微量元素的功能型食品添加剂。

本发明的技术方案：将金针菇孢子接种至新鲜的固体斜面上进行培养，待斜面长好后接种至加入了较低浓度的无机硒和锌离子的液体种子培养基中，培养扩大的同时，对菌种加以驯化，再将适量浓度的无机硒与无机锌加入到深层液体发酵培养基中培养，利用金针菇菌的富集与转化功能，使丝体中积累较高浓度的有机硒和有机锌。发酵结束后，通过对菌体的收集、烘干，得到同时富含有机硒元素、有机锌元素的金针菇菌丝体粉。

步骤为：

1)待用菌种的培养：

出发菌株为金针菇(Flammulina Valutipes)F12；该金针菇菌株已在“生物技术”杂志2002年06期，2002年12月，题目为《食用菌深层发酵工艺研究及功能性食品开发》中公开。

①斜面培养：

培养基配方以g/L计：麸皮40，蔗糖20，磷酸二氢钾3.0，硫酸镁1.5，琼脂20.0，pH自然；

培养方法：将保存在木屑上的菌种接种到新鲜的空白斜面上，在26±1℃下培养7-10天；

②一级摇瓶种子培养，装液量150mL/500mL：

培养基配方以g/L计：葡萄糖20，黄豆粉10，玉米粉25，磷酸二氢钾1.0，硫酸镁0.5和维生素B₁0.05，pH自然；