[发明专利]氯霉素眼用溶液的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于氯霉素眼用溶液的检测方法，特别属于含有没食子酸丙酯的氯霉素眼用溶液的检测方法。

背景技术

氯霉素眼用溶液即氯霉素滴眼液，是一种眼部常用的药品，曾经作为OTC甲类药品在市场上流通使用，其主要成份为氯霉素、缓冲液、抑菌剂、水，也有在氯霉素滴眼液中加入玻璃酸钠、甘油以增强粘度，改善在眼部的保留时间。《中国药典》2005年版二部中第778页公开了氯霉素滴眼液的检测方法，检测项目包括性状项、鉴别项、检查项、含量测定项、类别项、规格项、贮藏项，在检查项中包括PH值项、有关物质项、其它项的检测，在鉴别项中所提供的两种鉴别方法均为主药氯霉素的鉴别方法，方法1为颜色反应，方法2为高效液相色谱法。

药品通常的有效期或保质期为2年，而氯霉素滴眼液的有效期只能达到8-12个月，这是由于氯霉素滴眼液中氯霉素容易分解成氯霉素二醇物、对硝基苯甲醛，氯霉素二醇物及对硝基苯甲醛对眼睛有较强的刺激性，影响患者的使用。通过研究发现，通过对氯霉素滴眼液中物质成份进行调整，可以使氯霉素滴眼液的有效期提高至2年以上，这些物质成份直接影响氯霉素滴眼液的有效期，对氯霉素滴眼液的质量起着重要作用，有些物质成份还有一定的辅助治疗作用，但目前中国药典所记载的氯霉素滴眼液的检测方法中对这些物质没有进行鉴别或者含量测定，存在着一定的缺陷。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供完整的氯霉素眼用溶液的检测方法。

本发明解决技术问题的技术方案为：氯霉素眼用溶液的检测方法，包括中国药典中氯霉素滴眼液所有检测项目，在鉴别项中，增加了没食子酸丙酯的鉴别方法。

所述的没食子酸丙酯的鉴别方法为包括预处理步骤，颜色反应鉴别步骤：所述的预处理步骤为：取氯霉素滴眼液，加入混合菌种，在30-35℃保温搅拌不小于30分钟，过滤沉淀，即可，氯霉素滴眼液与混合菌种体积比为100∶0.5-5。

混合菌种可以选择性针对氯霉素滴眼液中氯霉素产生黄色沉淀，而不影响氯霉素滴眼液中其它的物质成份。

所述的混合菌种为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)CGMCC1.794、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)CGMCC 1.203、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)CGMCC 1.1246、其扩大培养液混合的体积比为6-10∶1-10∶4-8。

所述的颜色反应步骤为：取氯霉素滴眼液滤清液1-5毫升，加入1-2毫升90-100g/L的乙酸铵溶液，再加入1-5滴的显色剂，应显紫色。

所述的显色剂为将0.01克7水合硫酸亚铁及0.5克4水合酒石酸钾钠用水稀释至100毫升即可，临用前现配。

由于没食子酸丙酯在氯霉素滴眼液中的重量浓度为0.03％左右，为了更好的对氯霉素滴眼液中没食子酸丙酯的用量进行控制，还可利用紫外分光光度法，高效液相色谱法测定没食子酸丙酯的含量。

所述的紫外分光光度法为：取经过预处理步骤处理过的氯霉素滴眼液滤清液10-15毫升，加入显色剂1毫升，用水稀释到25毫升，摇均，按照紫外-可见分光光度法(中国药典附录IV A)，在540nm的波长处测定吸收度；

另取没食子酸丙酯对照品适量，加水溶解，配制不同的浓度，加入显色剂1毫升，用水稀释到25毫升，摇均，测量不同浓度的对照品在540nm的波长处的吸收度，作出标准曲线，以样品的吸收度与标准曲线的吸收度进行对比，从而得出样品中没食子酸丙酯的浓度。

所述的高效液相色谱法为：取经过预处理步骤处理过的氯霉素滴眼液滤清液适量，用无水甲醇稀释成每毫升溶液中含有没食子酸丙酯18-22μg的溶液，注入高效液相色仪，记录色谱图，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相为体积比为1-2∶98-99的乙酸、甲醇，检测波长280nm；

另取没食子酸丙酯对照品适量，用无水甲醇稀释成每毫升溶液中含有没食子酸丙酯18-22μg的溶液，同法测量，以外标法计算氯霉素滴眼液中没食子酸丙酯的含量。

当使用高效液相色谱法测量氯霉素滴眼液的含量后，还可在鉴别项中增加高效液相色谱鉴别方法，具体为：在含量测定项下的没食子酸丙酯测定中，氯霉素滴眼液中的没食子酸丙酯的保留时间应与没食子酸丙酯对照品的保留时间一致。

申请人认为没食子酸丙酯作为抗氧化剂，具有很强的清除溶液中自由基的作用，通过对氯霉素滴眼液中自由基的消除，能够使氯霉素滴眼液有效期达到2年以上，因此在中国药典的鉴别项中增加没食子酸丙酯的鉴别方法，能够更加有效的提高中国药典中氯霉素滴眼液检测的完整性。