[发明专利]酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法及其在医药和保健食品领域的应用，属于医药技术领域。

背景技术

黑刺菝葜(Smilax scobinicaulis C.H.Wright)又名短梗菝葜，是菝葜科菝葜属植物，生于低山灌丛或山谷河岸，主产于陕西、甘肃等省，广泛分布于北方地区，资源十分丰富。其根茎在我国北方代替威灵仙入药，商品上称为“铁丝威灵仙”、“金刚刺”、“金刚藤”等。煎汤或浸酒内服；研粉、磨汁调敷或煎水洗外用；具除风湿、活血解毒、镇惊息风和抗癌等功效，临床上用于治疗风湿性腰腿病、小儿惊风肠炎、瘰疬，疮疖、癌肿等病症。

中药黑刺菝葜中主要含有甾体皂苷类化学成分，其中主要皂苷类为含有拉肖皂苷元的甾体皂苷及其类似物，是制备拉肖皂苷元(Laxogenin)极好的原料(专利“一种从黑刺菝葜植物中制备拉肖皂苷元的方法”，申请号为200710199224.X)，而且具有抗肿瘤、抗菌等活性(张存莉等，林业科学，2006，42(9)：69-73；张存莉等，西北农林科技大学学报，2003，31(4)：163-166.)，因此研究黑刺菝葜总皂苷的制备方法具有重要的意义。

中草药成分复杂，有活性成分，也有如蛋白质、果胶、淀粉、植物纤维等非活性成分，这些成分既影响植物细胞中活性成分的浸出，又影响中药液体制剂的澄清度。选用相应的酶可将纤维素、淀粉、蛋白质、果胶等杂质分解去除，不仅有利于活性成分的提取，极大提高有效成分的得率，而且还可以回收利用酶解副产物，实现一物多用，清洁生产，保护环境。

发明内容

本发明的目的是提供一种酶法提取黑刺菝葜总皂苷的方法。

本发明制备的黑刺菝葜总皂苷提取物所涵盖的各种皂苷类活性成分之中，最主要的是黑刺菝葜皂苷a、黑刺菝葜皂苷b、黑刺菝葜皂苷c及其类似物等成分。其中主要化合物结构如下：

 化合物  R  英文名称 黑刺菝葜皂苷a  α-L-Ara-(1→6)-β-D-glu-  smilaxin A 黑刺菝葜皂苷b  β-D-Glu-(1→4)-[α-L-ara-(1→6)]-β-D-glu-  smilaxin B 黑刺菝葜皂苷c  β-D-Glu-

作为黑刺菝葜总皂苷提取物，其中各皂苷类成分百分含量的总和为70～100％(W/W)。

为了实现上述目的，本发明的技术解决方案是；首先将中药黑刺菝葜材料，干燥，粉碎成30～120目的粉末；按照一定的固液比，将粉末和水置于生物反应器中，搅拌成匀浆，调节pH值和温度，分别或依次加入纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、糖化酶、复合酶制剂等其中的一种或任意几种酶进行酶催化反应；酶解结束后，继续在40℃～100℃条件下保温0.5h～5h，促进甾体皂苷的浸出；然后过滤，滤渣中加入2～10倍量去离子水继续提取两次，每次1～3h，过滤，合并滤液，得粗总皂苷提取液；然后将粗总皂苷提取液进一步利用澄清处理法、溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、超临界流体萃取法、色谱法、液-液逆流分配色谱法等其中的任意一种方法，或这些方法的任意组合纯化得总皂苷提取物。

在使用这些方法进行制备时，一般包括以下几个步骤：

(1)原料处理