[发明专利]酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法

权利要求书

1.酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法，其特征在于首先将中药黑刺菝葜材料，干燥，粉碎成30～120目的粉末；按照一定的固液比，将粉末和水置于生物反应器中，搅拌成匀浆，调节pH值和温度，分别或依次加入纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、糖化酶、复合酶制剂等其中的一种或任意几种酶，酶解一定时间；酶解结束后，继续在40℃～100℃保温0.5h～5h，促进甾体皂苷的浸出；然后过滤，滤渣中加入2～10倍量去离子水继续提取两次，每次1～3h，过滤，合并滤液，得粗总皂苷提取液；然后将粗总皂苷提取液进一步利用澄清处理法，或溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、超临界流体萃取法、色谱法、液-液逆流分配色谱法等其中的任意一种方法，或这些方法的任意组合纯化得总皂苷提取物。

2.如权利要求1所述的酶法制备黑刺菝葜总皂苷提取物的方法，其特征在于在使用这些方法进行制备时，一般包括以下几个步骤：

原料处理：粉碎黑刺菝葜原材料，过30～120目的筛。

酶催化反应制备粗皂苷提取液：按照固液比1∶1～1∶20(原料的质量克数和水的体积毫升比)将原料粉末和水置于生物反应器中，调节pH值，按照原料的质量克数与酶液的毫升体积比10000∶1～1000∶5，分别加入纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、糖化酶等其中一种酶或其中两种或三种酶组成的复合酶，或依次加入其中的两种或三种、四种酶，按照下表所示控制最适酶解温度和pH值，酶解1～5h。

酶催化反应的pH值和温度

  酶种类  酶活力(U/g)  最适pH值  最适酶解温度(℃)  纤维素酶  ≥1000  4.5～6.5  30～55  果胶酶  ≥1000  3.0～10  25～60  淀粉酶法  ≥1500  4.0～7.5  50～90  糖化酶  ≥50000  3.5～6.5  55～70  复合酶  ≥1500  3.0～7.0  40～65

酶解过程中时时有氧搅拌；酶解结束后，继续在40℃～100℃继续保温0.5h～5h，促进甾体皂苷的浸出；然后过滤，滤渣中加入2～10倍量去离子水继续提取两次，每次1～3h，过滤，合并滤液，得粗总皂苷提取液。

粗总皂苷提取液的纯化：可以使用澄清处理法，或溶剂萃取法、大孔吸附树脂法、超临界流体萃取法、色谱法、液-液逆流分配色谱法等其中的任意一种方法，或这些方法的任意组合纯化得总皂苷提取物。

浓缩：常压或减压条件下的薄膜蒸发、旋转蒸发及煎煮等浓缩除去皂苷提取物中的溶剂。

干燥：真空干燥或喷雾干燥、冷冻干燥等方法，除去皂苷中残留溶剂，制备得黑刺菝葜总皂苷提取物。