[发明专利]一种海参皂苷含量的测定方法

权利要求书

1.一种海参皂苷含量的测定方法，其特征在于有下列步骤：(1)称取海参样品，将样品粉碎或切成小块，置于浓度为2mol/L-2.5mol/L的三氟乙酸水溶液中，在110℃-120℃下水解2-3小时，将水解液中和，过滤，定容，作为供试液；(2)称取喹诺糖，配制成6-8个浓度在0.01mmol/L-1mmol/L之间成浓度梯度的标准水溶液；(3)分别吸取相同体积的上述标准水溶液、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生剂和0.3mol/L-0.35mol/L氢氧化钠水溶液，在65-70℃下衍生反应25-35min，冷却8-10min，用盐酸水溶液中和；用氯仿萃取，吸弃下层，重复3次，将水层过滤，进行液相色谱分析，以喹诺糖衍生物的峰面积对喹诺糖的浓度进行线性回归，得到标准曲线；(4)取上述供试液进行衍生反应和液相色谱分析，以喹诺糖衍生物的峰面积代入上述标准曲线中求出样品中喹诺糖的含量；喹诺糖的含量乘以转化系数即得海参样品中皂苷的含量。

2.按权利要求1所述的海参皂苷含量的测定方法，其特征在于所述的海参皂苷为羊毛甾烷型三萜皂苷，苷元为18(20)内酯环，苷元的C-3通过β-O-糖苷键与寡糖链相连，喹诺糖是组成寡糖链的单糖之一。

3.按权利要求1所述的海参皂苷含量的测定方法，其特征在于所述的海参样品重量为0.05g-1g，加入三氟乙酸水溶液的量为2-3mL/g海参。

4.按权利要求1所述的海参皂苷含量的测定方法，其特征在于所述的衍生剂为0.45mol/L-0.5mol/L的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮甲醇溶液。

5.按权利要求1所述的海参皂苷含量的测定方法，其特征在于所述的液相色谱的分离条件为：ZORBAX Eclipse XDB-C18型色谱柱；22％乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液作为流动相；柱温25℃；流速1.0mL/min，检测波长为250nm。