[发明专利]暗消藤抗肺癌活性提取物及其化合物的制备工艺

权利要求书

1、暗消藤提取物，包括活性提取部位与活性成分，其特征在于：含有下列化合物中的一种或多种，acovenosigenin A  3-O--digitoxopyranoside，digitoxigenin gentiobioside，digitoxigenin3-O-[O- -glucopyranosyl-(1→6)-O- -glucopyranosyl-(1→4)-3-O-acetyl- -digitoxopyranoside]，digitoxigenin 3-O-[O--glucopyranosyl-(1→6)-O- -glucopyranosyl-(1→4)-O--digitoxopyranosyl-(1→4)- -cymaropyranoside，periplogenin3-O-(4-O- -glucopyranosyl- -digitalopyranoside)，acovenosigenin A，periplogenin 3-O- -digitoxoside，periplocymarin，periplogenin，digitoxigenin，digitoxigenin 3-O-[O- -D-glucopyranosyl-(1→6)-O- -D-glucopyranosyl-(1→4)-O- -D-digitoxopyranoside，digitoxigenin sophoroside，echujin，periplogenin glucoside，corchorusoside C，sualpinoside。

2、暗消藤提取物，其特征在于：所述的暗消藤其植物来源为萝藦科暗消藤Streptocaulon juventas的干燥根。

3、一种如权利要求1所述的暗消藤提取物的制备工艺，其特征在于：通过制备方法一所得的暗消藤水或醇的简单提取物通过大孔吸附树脂柱或聚丙烯酰胺柱或硅胶柱或经过萃取，或上述步骤组合进行，得到的适应不同要求含量不同的总强心苷活性部位；

其制备方法如下：

一.暗消藤药材的提取工艺

(1)暗消藤根粗粉，加X％醇回流提取，提取液减压回收醇至无醇味，浓缩为密度0.80-1.10的浓缩液，得到溶液I备用；

(2)暗消藤根粗粉，加水回流提取，提取液减压浓缩为密度0.80-1.10的浓缩液II，备用；

二.暗消藤中的活性部位的富集工艺

(1)将溶液I或溶液II上样于事先处理好的HPD-100柱，用30％，60％，90％乙醇洗脱，得到的60％乙醇洗脱物；

(2)溶液I或溶液II上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用10％乙醇，95％乙醇洗脱，得到的10％洗脱物；

(3)溶液I蒸干，用热水溶解，分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷的弱极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液，溶液II同法操作制得的正丁醇部分，为暗消藤的活性部位；

(4)溶液I或溶液II蒸干，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3∶1洗脱，得到的洗脱物为暗消藤的活性部位。

4、根据权利要求3所述的暗消藤提取物的制备工艺，其特征在于：所述的富集工艺还可以为上述富集路线1-4之间的两个或三个互相组合。

5、根据权利要求3或4所述的暗消藤提取物的制备方法，其特征在于：可以从活性部位中提取分离并鉴定出活性化合物，其制备方法如下：

将16克暗消藤60％乙醇部位，上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用水-醇梯度洗脱得到的含0-10％醇洗脱物，蒸干后干燥，称重为11g，有机溶剂溶解上样，二氯甲烷-甲醇(25∶1-1∶5)，得到6个流份(Fr.1-Fr.6)，流份2、3、4、5、6经反复硅胶柱层析、反相薄层制备、大孔树脂柱层析、重结晶分离得到单体化合物，并运用核磁共振，质谱，红外，气相手段，确定了结构、相对及绝对构型。

6、根据权利要求3所述的暗消藤提取物的制备工艺，其特征在于：X％是指醇浓度在1％-100％的醇性溶液，所述的醇指具有以下通式的饱和一元醇或不饱和一元醇：C_nH_2n+1OH或C_nH_2n-1OH(n＜5)；在混合洗脱剂中，醇所占的百分含量在1％-95％之间；所述的吸附树脂为苯乙烯类、苯丙酸类、丙稀酰胺类或氧化氮类大孔树脂中的一种或几种。