[发明专利]一种生物碱类化合物及其制备方法有效
申请号: | 200810010678.2 | 申请日: | 2008-03-17 |
公开(公告)号: | CN101538247A | 公开(公告)日: | 2009-09-23 |
发明(设计)人: | 张怡轩;吴春福 | 申请(专利权)人: | 沈阳药科大学 |
主分类号: | C07D239/553 | 分类号: | C07D239/553;C12P17/12;A61K31/513;A61P35/00;C12R1/465 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李宇彤 |
地址: | 110016辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物碱 化合物 及其 制备 方法 | ||
1.一种生物碱类化合物A的制备方法,所述的化合物A结构式如下, 其特征在于:该方法包括培养能够产生所述化合物A的假浅灰链霉菌 (Streptomyces pseudogriseolus)Y05A-1070CGMCC No.2362的培养条 件,以及从发酵液中回收所得到的化合物A,其具体步骤如下:
(1)假浅灰链霉菌Y05A-1070CGMCC No.2362的斜面培养方法:1L 斜面培养基组成:可溶性淀粉20g,NaCl 0.5g,KNO3 1g,K2HPO40.5g,FeSO4 0.01g,MgSO4.7H20 0.5g,琼脂粉20g,pH7.0, 28-30℃,培养7天;
(2)假浅灰链霉菌Y05A-1070 CGMCC No.2362的种子液培养方法: 1L种子培养基组成:黄豆粉5~15g,酵母膏3~7g,葡萄糖 10~30g,淀粉10~30g,K2HPO4 0.1-1.0g,(NH4)2SO4 0.1-3.0g, MgSO4.7 H2O 0.1-0.5g,CaCO3 0.1-5.0g,pH7.2,三角摇瓶装 量20-60%,转速100-250转/分钟,28-32℃,培养20-48小时;
(3)假浅灰链霉菌Y05A-1070 CGMCC No.2362的发酵方法:1L发酵 培养基组成:花生粉10-25g,酵母膏5-30g,葡萄糖0.5-30g, 蛋白胨0.1-10g,(NH4)2SO4 0.1-10g,KCl 0.1-3g,pH7.0,发 酵罐装量20-60%,接种量3-12%,转速100-250转/分钟,28-32 ℃,培养5-7天,发酵结束后,发酵产物经过板框压滤机过滤后, 得到菌丝体和发酵滤液两部分;
(4)步骤(3)得到的菌丝体部分,
(a)用清水洗2-3遍后,挤掉大部分水分,常温下晾干;
(b)菌丝体用甲醇提取数次,提取物减压浓缩得到浸膏;
(c)浸膏用蒸馏水分散,用乙酸乙酯提取数次,经100-200目 硅胶柱,以氯仿一乙酸乙酯为流动相梯度洗脱,分离和重结晶纯化, 得到化合物A
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