[发明专利]针对乙肝表面抗原的重组小鼠-人嵌合Fab

说明书

发明领域：

本发明涉及产生新的重组小鼠-人嵌合Fab抗体，其以高亲和性 结合乙肝表面抗原。

现有技术：

在天然感染后出现的保护性抗体大部分直接针对乙肝表面抗原 (HBsAg)的主要抗原性‘a’决定区。免疫优势‘a’表位是HBsAg 的大抗原性区域的部分，称为主要亲水性区，并且该表位出现在所有 的血清型中。因此提倡将针对HBsAg的抗体用于在针刺意外损失的情 况下针对乙肝感染的被动免疫疗法，用于肝移植患者等等。现在，从 超免疫供体的血液收集得到的人抗HB免疫球蛋白(HB1G)用于暴露后 预防。该血液衍生产品不是在印度制备的。作为血液衍生产品，抗HB HB1G是昂贵的并能引起交叉感染。

文献中已经报道少数几种抗HBsAg小鼠单克隆。然而，这些小鼠 抗体不适于治疗性应用，因为它们可以产生免疫原性反应。文献中也 报道了几种重组抗HBsAg抗体片段。然而，其大多数是小鼠来源并不 可用于治疗性应用。

大量文献报道免疫原性反应主要指向鼠抗体的Fc区。也已经观 察到通过用人恒定区交换鼠恒定区产生小鼠-人嵌合抗体，能够降低抗 体的免疫原性。这样的小鼠-人嵌合分子对治疗性用途更安全，并且目 前几种此类嵌合分子在临床上用于不同的疾病。

文献中已经报道了5种不同的重组抗HBsAg Fab抗体。它们都是 性质独特的，并且与本发明的重组分子不同。

发明目的：

本发明的目的是产生重组小鼠-人嵌合抗体片段，其针对乙肝表 面抗原。

另一个目的是开发重组小鼠-人嵌合Fab抗体，其以高亲和性和 特异性结合乙肝表面抗原。

还有另一个目的是显示其衍生来源的原始单克隆具有非常有助 于生物中和作用的结合特性。

另一个目的是生产重组小鼠-人嵌合Fab抗体，其与小鼠单克隆 相比具有更小的抗原性。

且另一个目的是生产重组小鼠-人嵌合Fab抗体，其更适于在体 内用于人。

另一个目的是产生小鼠-人嵌合抗体，其是更安全、更廉价的替 代物。

还有一个目的是开发重组分子，其具有/不具有任何修饰/与其他 分子组合而用于产生完整全长的抗体双特异性抗体、双功能抗体或含 有所述Fab的蛋白质分子的任何其他修饰。

且另一个目的是开发免疫缀合物，例如与酶、配体、受体、药物、 放射性同位素、毒素或任何其他大或小分子缀合用于体外或体内用途。

发明详述：

在说明书开始时，应当理解随后的说明书只是示例说明本发明的 具体形式。然而，这样的具体形式只是示例性的实施方式并且不旨在 限制性地用于暗示对本发明的范围任何限制。

有许多已知的方法来产生重组嵌合抗体。然而，每种重组嵌合抗 体在性质上都是独特的，如果并且仅如果(a)通过氨基酸序列定义的 其分子结构是独特的(b)具有通过对靶抗原的特异性和亲和性定义的 独特的生物功能。本发明的重组分子是独特的，因为没有其他分子与 该分子的结构和特性相匹配。该新型的分子也可通过许多其他广为记 载的策略来产生。

其他重组分子可具有相同的功能，因为它们结合乙肝表面抗原， 但具有不同序列的每种分子在表位特异性方面具有独特的结合特征， 即其结合的抗原的精确序列和为此结合的分子相互作用以及亲和性。

本文中，发明人产生了由重组Fd和重组嵌合轻链组成的重组嵌 合Fab抗体，其以高亲和性结合乙肝表面抗原。只有Fab而不是单独 的轻链和重链能够结合乙肝表面抗原，并且从而可用于病毒中和作用。