[发明专利]测定一种样品中激活的因子Ⅶa(FⅦa)浓度的方法

权利要求书

1.体外或离体测定一种样品中因子VIIa(FVIIa)浓度的方法，其包 括下列步骤：

a)将所述样品与一种人血浆混合，该人血浆缺乏FVII和从因子 VIII(FVIII)、因子IX(FIX)和因子XI(FXI)中选出的至少一种其它因子；

b)添加凝血酶生成反应的起始因子组分，该组分包括一种钙离 子源、一种磷脂剂和组织因子；

c)对获得的反应介质进行一种凝血酶生成试验(TGT)，以获得 提供参数的凝血酶生成图；

d)将该凝血酶生成图的至少一个参数与标准凝血酶生成图的 相应参数进行比较，所获得的每个标准凝血酶生成图具有于所述反 应介质中在1pM到5nM范围内的FVIIa的固定校准浓度，和

e)从步骤d)推断所述样品在所述范围内的FVIIa浓度的测定 值。

2.根据权利要求1的方法，其中，所述标准凝血酶生成图的参数的 测定是通过对包含同样的反应介质的标准样品进行一系列凝血酶生成试 验TGT，每个所述样品含有在1pM到5nM范围内的FVIIa的固定最终校 准的浓度。

3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于，在步骤d)所述凝血 酶生成图的参数的至少一个选自峰高、速度、延迟时间和达峰时间。

4.根据权利要求1到3的任一项的方法，其特征在于，所述含有F VIIa的样品是一种转基因哺乳动物奶样品或一种含有纯化的FVIIa的样 品。

5.根据权利要求1到4的任一项的方法，其特征在于，所述FVIIa 是一种血浆FVIIa(pFVIIa)、一种重组FVIIa(rFVIIa)或一种转基因FVIIa (TgFVIIa)。

6.根据权利要求1到5的任一项的方法，其特征在于，所述缺乏F VII和从FVIII、FIX和FXI中选出的至少一种其它因子的人血浆是一种免疫 清除的人血浆。

7.根据权利要求1到5的任一项的方法，其特征在于，所述缺乏F VII和从FVIII、FIX和FXI中选出的至少一种其它因子的人血浆是一种化学 清除的人血浆。

8.根据权利要求7的方法，其特征在于，所述缺乏因子VIII的人血浆 用EDTA化学清除。

9.试剂盒，它可用于实施权利要求1到8任一项所限定的方法，所 述试剂盒包括：

-一种缺乏FVII和从FVIII、FIX和FXI选出的至少一种其它因子的冻干 的血浆；

-一种含有一种磷脂剂和组织因子的冻干粉；

-一种钙离子源；和

-一种已知浓度的冻干的FVIIa样品，用以决定标准凝血酶生成图的 参数中的至少一个。

10.根据权利要求9限定的一种试剂盒的应用，所述试剂盒用于体 外或离体测定一种样品中FVIIa浓度。

11.根据权利要求10的应用，其特征在于，所述样品是一种转基因 哺乳动物奶样品或一种含有纯化的FVIIa的样品。

12.根据权利要求10或11的应用，其特征在于，所述FVIIa是一种 血浆FVIIa(pFVIIa)、一种重组FVIIa(rFVIIa)或一种转基因FVIIa(TgF VIIa)。

13.缺乏FVII和从FVIII、FIX和FXI选出的至少一种其它因子的人血浆 的应用，所述人血浆应用于体外或离体测定一种样品中FVIIa浓度。

14.根据权利要求13的应用，其特征在于，所述样品是一种转基因 哺乳动物奶样品或一种含有纯化的FVIIa的样品。

15.根据权利要求13或14的应用，其特征在于，所述FVIIa是一种 血浆FVIIa(pFVIIa)、一种重组FVIIa(rFVIIa)或一种转基因FVIIa(TgF VIIa)。