[发明专利]酶检测技术

说明书

背景技术

通常需要确定测试样品中的特定酶的存在或者量。在一些情况下，仅 酶的存在例如可以指示组织或者器官损伤的存在。同样地，异常的酶浓度 也可以指示其它病症，例如细菌或者病毒感染。例如，认为蛋白酶(例如 天冬氨酸蛋白酶)和金属肽酶增加了白色念珠菌(Candida albicans)的 致病性，白色念珠菌是可以引起念珠菌阴道炎(“酵母感染”)的微生物。 测试样品中的酶的存在或者浓度还可以作为对于某些类型的癌症或者其 它病症的诊断标记物。例如，前列腺特异性抗原(PSA)是前列腺癌的公 知的标记物。诊断标记物的其它实例包括组织蛋白酶A(癌症)、组织蛋 白酶G(肺气肿、类风湿性关节炎、炎症)、纤溶酶原激活物(血栓形成、 慢性炎症、癌症)和尿激酶(癌症)。

用于检测酶的存在的一个常规技术在授予Braach-Maksvytis等的美 国专利6348319中被描述。Braach-Maksvytis等通过检测酶对底物的消化 来发挥作用。例如，Braach-Maksvytis等的图1例示了包括第一区11和 第二区12的装置10。第一区11被提供有通过肽接头15与链霉抗生物素 蛋白14(探针)连接的聚合物珠13(载体)，可通过蛋白酶16裂解肽接 头。当添加蛋白酶16时，链霉抗生物素蛋白14释放并且传递到第二区 12，第二区包括通过膜的阻抗变化来检测链霉抗生物素蛋白存在的生物感 受器膜17。(第5栏25-30行)。然而，遗憾的是，技术例如Braach-Maksvytis 等描述的技术对于某些类型的应用例如需要患者进行相对快速的诊断(自 我诊断或者医护人员的帮助)的那些应用是极其复杂且成本抑制的。

因而，当前需要一种简单且廉价的技术用于精确地检测测试样品中的 酶的存在。

发明内容

根据一个实施方案，公开了一种用于检测测试样品中的酶或者其抑制 剂的侧流测定装置。该装置包括限定检测区的层析介质，分子底物，和能 够产生检测信号的可检测物质。例如，检测信号可以能够在检测区中产生 以确定酶或者其抑制剂的存在或者量。在一个实施方案中，接受材料可以 固定在检测区中，其能够与酶反应产物或者其复合物结合。在一个实施方 案中，层析介质还可以限定第二检测区，在第二检测区中能够产生第二检 测信号。例如，第二接受材料可以固定在第二检测区中，其能够与分子底 物或其复合物结合。

根据另一个实施方案，公开了一种用于检测测试样品中的酶或其抑制 剂的方法。该方法包括提供侧流检测装置，该侧流检测装置包括限定检测 区的层析介质。该侧流装置包括能够经历催化反应以形成产物的分子底 物，和用于直接或者间接产生检测信号的可检测物质。该方法包括使层析 介质与测试样品接触和确定检测区中的检测信号的存在或者强度。在一些 实施方案中，层析介质能够限定附加区。例如，层析介质可以限定施用区， 在施用区中测试样品可以接触层析介质。在一个实施方案中，层析介质可 以限定施用区的下游缀合区，在缀合区中可检测物质可以被可扩散地固 定。可以使用竞争或者夹心免疫测定法来检测测试样品中的酶的存在或者 浓度。

下面将更加详细地讨论本发明公开内容的其它特征和方面。

附图说明

针对本领域的技术人员，在说明书的余下部分中参考附图更加具体地 介绍包括其最佳方式在内的本发明的充分公开，在附图中：

图1是在侧流测定装置中可使用的测定装置的一个实施方案的透视 图；

图2是在侧流测定装置中可使用的测定装置的另一个实施方案的透 视图；

图3是在侧流测定装置中可使用的测定装置的另一个实施方案的透 视图；

图4是在一个实施方案中可使用的一种测定技术的示意例示；

图5是在一个实施方案中可使用的另一种测定技术的示意例示；

图6是在一个实施方案中可使用的另一种测定技术的示意例示；以及

图7示意地例示了从本文描述的测定装置的一个实施方案获得的结 果。

在本发明的说明书和附图中重复使用附图标记意图表示相同或者类 似特征或元件。

具体实施方式

定义