[发明专利]α-1,6-岩藻糖基转移酶表达的SHRNA介导的抑制

权利要求书

1.在哺乳动物细胞中重组产生具有降低的岩藻糖修饰程度的异源多 肽的方法，该方法包括以下步骤：

-在适合表达所述异源多肽的条件下培养所述哺乳动物细胞，

-从所述哺乳动物细胞或培养物回收所述异源多肽，并从而产生所述 异源多肽，

其中所述哺乳动物细胞用以下核酸转染：

i)SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6的第一核酸，其被转录为针对 α1，6-岩藻糖基转移酶mRNA的shRNA，和

ii)第二核酸，其编码异源免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或免疫球蛋 白缀合物。

2.权利要求1的方法，其特征在于所述培养所述哺乳动物细胞在LCA 的存在下进行。

3.权利要求1或2的方法，其特征在于所述哺乳动物细胞用

iii)编码新霉素选择标记或l-NGFR的第三核酸转染，其中l-NGFR是 低亲和力神经生长因子受体的截短形式。

4.权利要求1或2的方法，其特征在于所述哺乳动物细胞用一个核酸 转染，该核酸包含：

-SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6的第一核酸，其被转录为针对α1，6- 岩藻糖基转移酶mRNA的shRNA，

-编码新霉素选择标记或l-NGFR的第二核酸，其中l-NGFR是低亲 和力神经生长因子受体的截短形式，和

-编码所述异源多肽的第三核酸。

5.权利要求1或2的方法，其特征在于所述哺乳动物细胞选自包括 CHO细胞、BHK细胞、NS0细胞、SP2/0细胞、HEK 293细胞、HEK 293 EBNA细胞、PER.C6细胞和COS细胞的哺乳动物细胞组。

6.核酸，其包含

-选自SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6的核酸组的第一核酸，

-编码新霉素选择标记或l-NGFR的第二核酸，其中l-NGFR是低亲 和力神经生长因子受体的截短形式，和

-编码异源多肽的第三核酸，所述异源多肽选自包含免疫球蛋白、免 疫球蛋白片段和免疫球蛋白缀合物的异源多肽组。

7.包含权利要求6的核酸的哺乳动物细胞。