[发明专利]制备共聚物-1的改进方法

说明书

技术领域

本发明披露的主题大体上涉及用于聚合氨基酸的方法。更具体而言， 本发明披露的主题涉及制备共聚物-1的方法。

背景技术

共聚物-1(copolymer-1)是多肽的复杂混合物(complex mixture)，所述多肽 是由对氨基酸，即谷氨酸、赖氨酸、丙氨酸和酪氨酸进行聚合而制备的。 共聚物-1也称为乙酸格拉默(glatiramer acetate，GA)，并且具有以下结构式：

(Glu，Ala，Lys，Tyr)_x XCH₃COOH

(C₅H₉NO₄·C₃H₇NO₂·C₆H₁₄N₂O₂·C₉H₁₁NO₃)_x·XC₂H₄O₂

乙酸格拉默是(Teva Pharmaceutical Industries Ltd.，Israel) 的活性成份，其包含合成多肽的乙酸盐，所述合成多肽含有四种天然存在 的氨基酸：L-谷氨酸、L-丙氨酸、L-酪氨酸和L-赖氨酸，这四种氨基酸所 报道的平均摩尔分数(molar fraction)分别为0.141、0.427、0.095和0.338。

乙酸格拉默用于治疗复发-缓解型多发性硬化(relapsing-remitting form of multiple sclerosis，RRMS)。

发明内容

本发明披露的主题提供了制备共聚物-1的方法。

在一个实施方案中，使N-羧基环内酸酐(N-carboxyanhydrides，NCAs) 的混合物与聚合引发剂接触以引发N-羧基环内酸酐的混合物的聚合，从而 形成受保护的共聚物-1，所述N-羧基环内酸酐包含丙氨酸、受保护的谷氨 酸、受保护的赖氨酸，以及酪氨酸，其中受保护的谷氨酸含有苄基或甲氧 基保护基，以及受保护的赖氨酸含有环酰亚胺(cyclic imide)或叔丁氧基羰基 (Boc)保护基。然后可用一种或多种脱保护剂处理受保护的共聚物-1，和/或 对受保护的共聚物-1进行解聚。在一个实施方案中，所述方法包括对受保 护的谷氨酸和受保护的赖氨酸进行脱保护，从而生成共聚物-1。

在一些实施方案中，所述方法还包括：在进行N-羧基环内酸酐混合物 的聚合时，测量共聚物-1的分子量。在聚合进行时测量分子量使得可以在 共聚物-1已经获得期望的分子量时终止聚合反应，或者在一些实施方案中， 终止解聚反应(depolymerization reaction)。在一个实施方案中，可通过一种 或多种联机方法(in-line method)、在线方法(on-line method)、离线方法 (off-line method)，以及所述方法的组合来确定分子量。在一个实施方案中， 在聚合反应进行时可通过以下方式确定分子量：使用红外(IR)探针来测量反 应混合物中氨基甲酸酯部分基的量(通过氨基甲酸酯部分的一种或多种特征 性红外吸收带的强度确定)。然后可以使测量的氨基甲酸酯部分的量与模型 (所述模型将分子量关联为反应混合物中存在的氨基甲酸酯部分的量的函数) 相关联。在另一实施方案中，可在解聚反应期间测量酰胺羰基部分的量。 可以使测量的酰胺羰基部分的量与模型(所述模型将分子量关联为反应混合 物中存在的酰胺羰基部分的量的函数)相关联。

本发明披露的方法克服了可能与制备多肽如共聚物-1的现有技术方法 相关的许多问题。更具体而言，本发明披露的方法能够更有效，并且能够 合成具有期望分子量的共聚物-1。

在上文中已经说明了本发明所披露主题的某些方面，这些方面可通过 本发明披露的主题整体或部分地得到解决，并且随着本申请说明书的展开 以及当与下文中最佳描述的实施例和附图结合时，其它方面将会变得明显。

附图说明

由于已概括地描述了本发明披露的主题，现在参照附图(附图未必是按 比例绘制的)，以及其中：

图1是描述用于制备共聚物-1的本发明所披露方法的代表性非限制实 施方案，其中谷氨酸用甲氧基保护基保护，以及赖氨酸用Boc保护基保护； 以及